増幅された腫瘍mRNAをトランスフェクトした自己樹状細胞による皮膚T細胞リンパ腫Ex vivoに対するT細胞応答の誘導

皮膚T細胞リンパ腫の白血病変異体であるセザリー症候群（SZS）は、不治です。腫瘍mRNAをトランスフェクトした樹状細胞（DCS）は、特定の癌患者の抗腫瘍免疫を刺激する可能性があります。この研究では、セザリ細胞からのmRNAがDCSの負荷と抗腫瘍免疫の刺激に使用できるかどうかを判断しました。自家DCは、SZSの10人の患者から末梢血の単球から生成されました。総RNAをセザリ細胞から抽出し、in vitro転写でT7によって増幅しました。RNAにトランスフェクトされたDCSによる抗腫瘍IFN-GAMMAおよびグランザイムB（GRB）産生細胞毒性Tリンパ球（CTL）の誘導は、ELISPOTアッセイによって決定されました。SZSの単球由来DCによるIL-12p70産生にIFN-Gammaが必要であることがわかりました。発癌性転写因子のねじれとチロシンキナーゼ受容体EPHA4は、セザリ細胞と対に増幅されたmRNAの総RNAで発現しました。RNAトランスフェクトDCは、10人の被験者のうち7人に抗腫瘍IFN-Gamma生産CTLを誘導し、9人の被験者のうち6人でGRB産生CTLを誘導しました。CD3+ CD8+ T細胞とCD4+ CD25+ T細胞の両方が、調節T細胞の誘導なしで拡張されました。これらのデータは、SZS患者の特定の抗原を必要とせずに少量の腫瘍細胞を必要とするワクチン戦略に腫瘍mRNAを使用するという概念をサポートしています。

Sézary syndrome (SzS), the leukemic variant of cutaneous T-cell lymphomas, is incurable. Dendritic cells (DCs) transfected with tumor mRNA can stimulate antitumor immunity in certain cancer patients. In this study, we determined whether mRNAs from Sézary cells could be used for loading DCs and stimulating antitumor immunity. Autologous DCs were generated from monocytes of the peripheral blood from 10 patients with SzS. Total RNA was extracted from Sézary cells and amplified by T7 in vitro transcription. The induction of antitumor IFN-gamma and granzyme B (GrB)-producing cytotoxic T lymphocytes (CTL) by RNA-transfected DCs was determined by ELISPOT assays. We found that IFN-gamma was required for IL-12p70 production by monocyte-derived DCs from SzS. The oncogenic transcription factor Twist and the tyrosine kinase receptor EphA4 were expressed in total RNA from Sézary cells and the paired amplified mRNAs. RNA-transfected DCs induced antitumor IFN-gamma-producing CTLs in 7 of 10 subjects and GrB-producing CTLs in 6 of 9 subjects. Both CD3+CD8+ T cells and CD4+CD25+ T cells were expanded without induction of regulatory T cells. These data support the concept of using tumor mRNA for a vaccine strategy that requires small amounts of tumor cells without need for specific antigens in patients with SzS.