セピアプテリンの細胞取り込みとテトラヒドロビオプテリンのプッシュプル蓄積

セピアプテリンの細胞摂取は、テトラヒドロビオプテリンの効率的な蓄積をもたらしました。テトラヒドロビオプテリンは、セピアプテリンまたはジヒドロビオプテリンよりも細胞膜全体ではるかに少ない誘惑性があります。細胞によるセピアプテリンの取り込みは、セピアプテリン還元酵素の阻害剤であるN-アセチルセロトニンによる代謝停止中に検査されました。以前に蓄積されたセピアプテリンの放出プロファイルも分析されました。2つのルートは明確に区別できました。つまり、迅速で遅いです。どちらも明らかに双方向であり、タイプが平衡化されていました。各ルートは、セル内で何らかの形で分離された混合性プールに接続されていました。迅速なプロセスは、現在の細胞処理方法によって分析するには速すぎました。より遅いプロセスは、N-アセチルセロトニンの非存在下でセピアプテリンのテトラヒドロビオプテリンへの変換に関連していたため、このルートは、サルベージ経路の使用がセピアプテリンレディングエーゼとジヒドル酸化葉酸酵素によって強く駆動されたサイトゾルコンパートメントに開かれたことを示唆しています。テトラヒドロビオプテリンの蓄積。その結果、セピアプテリンは細胞によって強制的に取り上げられ、そこでサイトゾル内のテトラヒドロビオプテリンを連続的に蓄積しました。

Cellular uptake of sepiapterin resulted in an efficient accumulation of tetrahydrobiopterin. Tetrahydrobiopterin is much less permeable across the cell membrane than sepiapterin or dihydrobiopterin, the precursors of the tetrahydrobiopterin-salvage pathway. The uptake of sepiapterin by the cell was examined under metabolic arrest with N-acetylserotonin, an inhibitor of sepiapterin reductase. The release profile of previously accumulated sepiapterin was also analyzed. Two routes were clearly distinguishable, namely rapid and slow. Both were apparently bi-directional and equilibrating in type. Each route was connected to non-mixable pools somehow separated in the cell. The rapid process was too fast to analyze by the current methods of cell handling. The slower process was associated with conversion of sepiapterin to tetrahydrobiopterin in the absence of N-acetylserotonin, suggesting that this route opens into the cytosolic compartment where use of the salvage pathway was strongly driven by sepiapterin reductase and dihydrofolate reductase with a supply of NADPH which favors tetrahydrobiopterin accumulation. Consequently, sepiapterin was enforcedly taken up by the cell where it accumulated tetrahydrobiopterin in the cytosol in continuous manner.