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背景と目的：肝星細胞（HSC）および門脈線維芽細胞（PFS）は、成体肝臓の2つの異なる間葉系細胞です。副鼻腔のHSCは脂質を蓄積し、p75ニューロトロフィン受容体（P75NTR）を発現します。HSCとPFSは、肝臓の再生と線維症において極めて重要な役割を果たします。しかし、胎児肝臓における間葉細胞の役割はよく理解されていないままです。この研究では、マウス胎児肝臓の間葉系細胞を特徴付けることを目指しました。 方法：フローサイトメトリーと免疫組織化学に適用可能な抗P75NTRモノクローナル抗体を調製しました。フローサイトメトリーによって胎児肝臓から分離されたP75NTR（+）細胞は、逆転写ポリメラーゼ連鎖反応、免疫組織化学、および細胞培養によって特徴付けられました。脂質含有細胞は、油赤O染色によって視覚化されました。 結果：胎児肝臓のP75NTR（+）細胞は、内皮細胞とはっきりと区別され、間葉系細胞の特性を示しました。胚の日（E）10.5では、P75NTR（+）細胞が肝臓芽の周辺に存在し、内皮細胞と密接に接触し、E11.5で肝臓に広がりました。肝臓建築の形成により、それらは2つの異なる領域、実質および門脈領域、および脂質含有p75NTR（+）細胞にそれに応じて増加し始めました。門脈の周りのP75NTR（+）細胞は胆管細胞に隣接しており、肝芽細胞を胆管細胞にコミットするための重要な要因であるJagged1を発現しました。培養により、p75NTR（+）細胞は、グリア線維性酸性タンパク質とアルファスムース筋アクチンの発現が著しく増加した成体HSCの特徴を示しました。 結論：胎児肝臓のP75NTR（+）間葉系細胞には、HSCおよびPFSの前駆細胞が含まれ、抗P75NTRモノクローナル抗体はその分離に役立ちます。
背景と目的：肝星細胞（HSC）および門脈線維芽細胞（PFS）は、成体肝臓の2つの異なる間葉系細胞です。副鼻腔のHSCは脂質を蓄積し、p75ニューロトロフィン受容体（P75NTR）を発現します。HSCとPFSは、肝臓の再生と線維症において極めて重要な役割を果たします。しかし、胎児肝臓における間葉細胞の役割はよく理解されていないままです。この研究では、マウス胎児肝臓の間葉系細胞を特徴付けることを目指しました。 方法：フローサイトメトリーと免疫組織化学に適用可能な抗P75NTRモノクローナル抗体を調製しました。フローサイトメトリーによって胎児肝臓から分離されたP75NTR（+）細胞は、逆転写ポリメラーゼ連鎖反応、免疫組織化学、および細胞培養によって特徴付けられました。脂質含有細胞は、油赤O染色によって視覚化されました。 結果：胎児肝臓のP75NTR（+）細胞は、内皮細胞とはっきりと区別され、間葉系細胞の特性を示しました。胚の日（E）10.5では、P75NTR（+）細胞が肝臓芽の周辺に存在し、内皮細胞と密接に接触し、E11.5で肝臓に広がりました。肝臓建築の形成により、それらは2つの異なる領域、実質および門脈領域、および脂質含有p75NTR（+）細胞にそれに応じて増加し始めました。門脈の周りのP75NTR（+）細胞は胆管細胞に隣接しており、肝芽細胞を胆管細胞にコミットするための重要な要因であるJagged1を発現しました。培養により、p75NTR（+）細胞は、グリア線維性酸性タンパク質とアルファスムース筋アクチンの発現が著しく増加した成体HSCの特徴を示しました。 結論：胎児肝臓のP75NTR（+）間葉系細胞には、HSCおよびPFSの前駆細胞が含まれ、抗P75NTRモノクローナル抗体はその分離に役立ちます。
BACKGROUND & AIMS: Hepatic stellate cells (HSCs) and portal fibroblasts (PFs) are 2 distinct mesenchymal cells in adult liver. HSCs in sinusoids accumulate lipids and express p75 neurotrophin receptor (p75NTR). HSCs and PFs play pivotal roles in liver regeneration and fibrosis. However, the roles of mesenchymal cells in fetal liver remain poorly understood. In this study, we aimed to characterize mesenchymal cells in mouse fetal liver. METHODS: We prepared an anti-p75NTR monoclonal antibody applicable for flow cytometry and immunohistochemistry. p75NTR(+) cells isolated from fetal liver by flow cytometry were characterized by reverse-transcription polymerase chain reaction, immunohistochemistry, and cell cultivation. Lipid-containing cells were visualized by Oil-red O staining. RESULTS: p75NTR(+) cells in fetal liver were clearly distinct from endothelial cells and showed characteristics of mesenchymal cells. At embryonic day (E) 10.5, p75NTR(+) cells were present at the periphery of the liver bud in close contact with endothelial cells, and spread over the liver at E11.5. With the formation of the liver architecture, they began to localize to 2 distinct areas, parenchymal and portal areas, and lipid-containing p75NTR(+) cells increased accordingly. p75NTR(+) cells around portal veins were adjacent to cholangiocytes and expressed Jagged1, a crucial factor for the commitment of hepatoblasts to cholangiocytes. By cultivation, p75NTR(+) cells showed features of adult HSCs with markedly increased expression of glial fibrillary acidic protein and alpha-smooth muscle actin. CONCLUSIONS: p75NTR(+) mesenchymal cells in fetal liver include progenitors for HSCs and PFs, and the anti-p75NTR monoclonal antibody is useful for their isolation.
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