JNJ-27141491 [（s）-3- [3,4-ジフルオロフェニル） - プロピル] -5-イソキサゾール-5-thioxo-2,3-ジヒドロ-1H-イミダゾール-4-カルボン酸の薬理学的プロファイルメチルエステル]、ヒトケモカイン受容体CCR2の非競争的および経口活性拮抗薬として

CCケモカイン受容体2（CCR2）とMCP-1などの単球化学誘引物質タンパク質間の相互作用は、炎症性白血球の活性化と動員を調節します。この研究では、（S）-3- [3,4-ジフルオロ - フェニル） - プロピル] -5-イソキサゾール-5-Ill-2-Thioxo-2,3-ジヒドロ-1H-イミダゾール-4-カルボンを特徴づけましたヒト（H）CCR2の非競争的および経口活性官能的拮抗薬としての酸メチルエステル（JNJ-27141491）。JNJ-27141491は、MCP-1誘導グアノシン5'-O-（3- [（35）] Thio）三リン酸結合など、HCCR2を介したin vitro関数を強く抑制しました。MCP -1、-3、および-4誘導Ca（2+）動員。MCP-1（IC（50）= 7-97 nm）に対する白血球走化性は、テストされた他のケモカイン受容体の機能にほとんどまたはまったく影響しませんでした。CCR2機能の阻害は、克服可能で可逆的であり、非競争モードと一致していました。JNJ-27141491は（125）I-MCP-1のヒト単球への結合をブロックしました（IC（50）= 0.4 microM）が、マウス、ラット、および犬細胞へのMCP-1結合に影響を与えませんでした（IC（50）> 10 microM）。したがって、マウス（M）CCR2遺伝子がヒトの対応物に置き換えられたトランスジェニックマウスは、in vivo検査のために生成されました。これらのマウスでは、JNJ-27141491の経口投与量依存的に[5-40 mg/kg Q.D.（1日1回）またはB.I.D.]は、気管内MMCP-1/リポ多糖染色の48時間後に単球および好中球の動員を肺胞スペースに阻害しました。さらに、JNJ-27141491（20 mg/kg Q.D.）による治療により、発症が大幅に遅れ、多発性硬化症の実験的自己免疫性脳脊髄炎モデルの神経徴候の兆候が一時的に減少しました。まとめると、これらの結果は、JNJ-27141491を、トランスジェニックHCCR2発現マウスにおける経口抗炎症活性を発揮できるHCCR2の非競争的、機能的拮抗薬であると特定しています。

The interaction between CC chemokine receptor 2 (CCR2) with monocyte chemoattractant proteins, such as MCP-1, regulates the activation and recruitment of inflammatory leukocytes. In this study, we characterized (S)-3-[3,4-difluoro-phenyl)-propyl]-5-isoxazol-5-yl-2-thioxo-2,3-dihydro-1H-imidazole-4-carboxyl acid methyl ester (JNJ-27141491) as a noncompetitive and orally active functional antagonist of human (h)CCR2. JNJ-27141491 strongly suppressed hCCR2-mediated in vitro functions, such as MCP-1-induced guanosine 5'-O-(3-[(35)S]thio)triphosphate binding; MCP-1, -3, and -4-induced Ca(2+) mobilization; and leukocyte chemotaxis toward MCP-1 (IC(50) = 7-97 nM), whereas it had little or no effect on the function of other chemokine receptors tested. The inhibition of CCR2 function was both insurmountable and reversible, consistent with a noncompetitive mode of action. JNJ-27141491 blocked the binding of (125)I-MCP-1 to human monocytes (IC(50) = 0.4 microM), but it failed to affect MCP-1 binding to mouse, rat, and dog cells (IC(50) > 10 microM). Therefore, transgenic mice, in which the mouse (m)CCR2 gene was replaced by the human counterpart, were generated for in vivo testing. In these mice, oral administration of JNJ-27141491 dose-dependently [5-40 mg/kg q.d. (once daily) or b.i.d.] inhibited monocyte and neutrophil recruitment to the alveolar space 48 h after intratracheal mMCP-1/lipopolysaccharide instillation. Furthermore, treatment with JNJ-27141491 (20 mg/kg q.d.) significantly delayed the onset and temporarily reduced neurological signs in an experimental autoimmune encephalomyelitis model of multiple sclerosis. Taken together, these results identify JNJ-27141491 as a noncompetitive, functional antagonist of hCCR2, capable of exerting oral anti-inflammatory activity in transgenic hCCR2-expressing mice.