リボフォリンIは、オリゴサカリルトランスフェラーゼコアへの基質送達を調節します

タンパク質N-グリコシル化は生物学的系の間で広まっており、新しく合成されたタンパク質の適切なアスパラギン残基に脂質結合グリカンを移動する基本的なプロセスは、原核生物と真核生物の両方で発生します。コア反応はSTT3Pファミリーメンバーによって媒介され、多くの生物では、この成分だけで、いわゆるオリゴサカリルトランスフェラーゼ（OST）を構成するのに十分です。しかし、真核生物は通常、より精巧なOSTを持ち、定義が不十分な機能のいくつかの追加のサブユニットがあります。哺乳類のOST複合体では、そのようなサブユニット、リボフォリンIは、小胞体での生合成中に特定の前駆体のN-グリコシル化を促進するために提案されています。ここでは、細胞培養モデルを使用して、リボフォリンIの枯渇がN-グリコシル化に基質特異的欠陥をもたらし、リボフォリンIの定義された生理学的役割を明確に確立することを示しています。N-グリコシル化反応中の新生糖タンパク質の環境を探索するために使用されます。リボフォリンIは、基質をキャプチャして触媒コアに提示することにより、OST複合体への前駆体タンパク質の送達を調節できることを初めて示します。

Protein N-glycosylation is widespread among biological systems, and the fundamental process of transferring a lipid-linked glycan to suitable asparagine residues of newly synthesized proteins occurs in both prokaryotes and eukaryotes. The core reaction is mediated by Stt3p family members, and in many organisms this component alone is sufficient to constitute the so called oligosaccharyltransferase (OST). However, eukaryotes typically have a more elaborate OST with several additional subunits of poorly defined function. In the mammalian OST complex one such subunit, ribophorin I, is proposed to facilitate the N-glycosylation of certain precursors during their biogenesis at the endoplasmic reticulum. Here, we use cell culture models to show that ribophorin I depletion results in substrate-specific defects in N-glycosylation, clearly establishing a defined physiological role for ribophorin I. To address the molecular mechanism of ribophorin I function, a cross-linking approach was used to explore the environment of nascent glycoproteins during the N-glycosylation reaction. We show for the first time that ribophorin I can regulate the delivery of precursor proteins to the OST complex by capturing substrates and presenting them to the catalytic core.