ヒト赤血球の酸化ストレスのマーカーとしてのアラントイン

背景：尿酸は、ヒトのプリン代謝の最終産物です。この化合物には重要な抗酸化特性があり、さまざまな活性酸素種によってアラントインに酸化される可能性があると判断されました。したがって、アラントインの測定は、人間の酸化ストレスの測定に役立つ可能性があります。 方法：血液透析（n = 30）および献血者（n = 30）の前に慢性腎不全患者から得られたヒト血漿および赤血球のアラントインと尿酸を測定しました。AG 1-X8樹脂の脱タンパク性血漿および赤血球溶解物サンプルからのアラントインの選択的分離と、グリオキシレート-2、4-ジニトロフェニルヒドラゾンへの誘導体化に基づく方法を使用しました。干渉物質からのグリオキシレート-2、4-ジニトロフェニルヒドラゾンの分離は、勾配溶出および360 nmでのUV/VIS検出を伴う逆相HPLCで達成されました。尿酸は、292 nmのUV/VIS検出を伴う逆相HPLCによって決定されました。 結果：慢性腎不全の患者と対照群の間で、血漿中の対照群の間でアラントインと尿酸濃度の有意差を発見した（20.5 +/- 6.5マイクロモール/Lおよび323.9 +/- 62.9マイクロモール/L対2.1 +/--1.1マイクロモール/Lおよび270.1 +/- 62.3マイクロモール/L、P <0.05）および赤血球[82.8 +/- 39.1 nmol/gヘモグロビン（HB）および110.7 +/- 28.8 nmol/g hb対20.1 +/- 6.1Nmol/g Hbおよび82.1 +/- 23.7 nmol/g Hb、p <0.05]。 結論：慢性腎不全患者の血漿と赤血球の両方における有意な高いレベルのアラントインは、アラントインが酸化ストレスの良好なマーカーとして使用される可能性があることを示しています。

BACKGROUND: Uric acid is the final product of purine metabolism in humans. It was determined that this compound has important antioxidative properties and it may be oxidized to allantoin by various reactive oxygen species. Therefore, the measurement of allantoin may be useful for the determination of oxidative stress in humans. METHODS: We measured allantoin and uric acid in human plasma and erythrocytes obtained from patients with chronic renal failure before hemodialysis (n=30) and blood donors (n=30). We used a method based on selective isolation of allantoin from deproteinized plasma and erythrocyte lysate samples on AG 1-X8 resin and its derivatization to glyoxylate-2, 4-dinitrophenylhydrazone. Separation of glyoxylate-2, 4-dinitrophenylhydrazone from interfering substances was achieved on reversed phase HPLC with gradient elution and UV/VIS detection at 360 nm. Uric acid was determined by reversed phase HPLC with UV/VIS detection at 292 nm. RESULTS: We found significant differences in allantoin and uric acid concentration between the patients with chronic renal failure and the control group both in plasma (20.5+/-6.5 micromol/L and 323.9+/-62.9 micromol/L vs. 2.1+/-1.1 micromol/L and 270.1+/-62.3 micromol/L, p<0.05) and erythrocytes [82.8+/-39.1 nmol/g hemoglobin (Hb) and 110.7+/-28.8 nmol/g Hb vs. 20.1+/-6.1 nmol/g Hb and 82.1+/-23.7 nmol/g Hb, p<0.05]. CONCLUSIONS: Significant higher levels of allantoin in both plasma and erythrocytes of patients with chronic renal failure indicate that allantoin may be used as a good marker of oxidative stress.