疾患進行のための細胞外マトリックスマーカーと、家族性アミロイド多筋症V30M TTR関連の治療の追跡調査

家族性アミロイドティック性多発性症状（FAP）は、末梢神経の特別な関与を伴う、フィブリラートランスシレチン（TTR）アミロイドの細胞外沈着を特徴とする障害です。FAP患者の組織、すなわちメタロプロテイナーゼ-9（MMP-9）、好中球ゲラチナーゼ関連リポカリン（NGAL）およびビッグサンのいくつかの細胞外マトリックスタンパク質が発見されています。この研究では、FAP V30M TTR関連のトランスジェニックマウスモデルにおけるMMP-9、メタロプロテイナーゼ1（TIMP-1）、NGAL、ビッグサン、コンドロイチン硫酸塩（CSPG）の組織阻害剤のレベルを評価しました。線維堆積物を除去するための2つの異なる治療アプローチ。免疫組織化学またはRT-PCR分析により、非繊維状態に堆積したTTRを呈する動物でビッグチャンがすでに増加していることが示されましたが、MMP-9、TIMP-1、NGAL、およびCSPGはTTRアミロイド沈着のマウスでのみ上昇しました。TTRフィブリル分解物であるドキシサイクリンで治療されたマウスは、マトリックスの回復を示唆するMMP-9、TIMP-1、およびNGALのより低いレベルを示しました。TTR Y78Fを免疫してTTR堆積を除去するマウスは、5つのテストされたマーカーすべての大幅なレベルが有意に低いことを示し、フィブリラーおよび非繊維堆積物の除去を示唆しています。オリゴマーTTRを使用した細胞研究は、可溶性TTR、大きな凝集体、またはフィブリルと比較した場合、MMP-9の誘導を示しました。さらに、この誘導は、高度な糖化最終産物（RAGE）抗体の抗受容体によって中和され、このプロセスへの怒りの関与を示しています。より多くの組織サンプルでのさらなる研究では、FAPおよび他のアミロイドーゼにおける前臨床および臨床段階の組織特性評価におけるコンゴ赤染色と並行したこれらのECMマーカーの適用を示しています。

Familial Amyloidotic Polyneuropathy (FAP) is a disorder characterized by the extracellular deposition of fibrillar Transthyretin (TTR) amyloid, with a special involvement of the peripheral nerve. Several extracellular matrix proteins have been found elevated in tissues from FAP patients, namely metalloproteinase-9 (MMP-9), neutrophil gelatinase associated lipocalin (NGAL) and biglycan. In this work we assessed the levels of MMP-9, tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (TIMP-1), NGAL, biglycan and chondroitin sulphate (CSPG) in an FAP V30M TTR-related transgenic mouse model at different stages of TTR deposition and after two different treatment approaches to remove fibrillar deposits. Immunohistochemistry or RT-PCR analysis showed that biglycan was already increased in animals presenting TTR deposited in a non-fibrillar state, whereas MMP-9, TIMP-1, NGAL and CSPG were elevated only in mice with TTR amyloid deposits. Mice treated with doxycycline, a TTR fibril disrupter, presented lower levels of MMP-9, TIMP-1 and NGAL, suggestive of matrix recovery. Mice immunized with TTR Y78F to remove TTR deposition showed significantly lower levels of all the five tested markers, suggesting removal of fibrillar and non-fibrillar deposits. Cellular studies using oligomeric TTR showed induction of MMP-9 when compared to soluble TTR, large aggregates or fibrils. Furthermore, this induction was neutralized by an anti-receptor for advanced glycation end products (RAGE) antibody, indicating RAGE engagement in this process. Further studies in a larger number of tissue samples will indicate the application of these ECM markers in parallel with Congo Red staining in tissue characterization of pre-clinical and clinical stages in FAP and other amyloidoses.