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ヒトの腸内病原体であるEntamoeba histolytica、および爬虫類のAmebae E. Barreti、E。Invadens、およびE. Terrapinaeを栽培するための最初の血清フリーの部分的に定義された培地(PDM-805)について説明します。PDM-805は、これらの寄生虫の軸培養に広く使用されている媒体であるTYI-S-33の酵母抽出物、ウシ血清、およびカゼインペプトンダイジェストの段階的な置換により開発されました。定義された成分には、アミノ酸、炭水化物、ビタミンB、アスコルビン酸、トコフェロール、チオクチン酸、核酸前駆体、微量金属、リン酸緩衝液が含まれます。未定義の成分には、高度に精製されたウシ血清アルブミン、ウシ血清のリポタンパク質コレステロール溶液、およびカゼインペプトンから調製された3,500未満の分子量を有する透析可能なオートクレーブ可能な水溶性成長因子が含まれます。これまで、E。histolytica、株200:NIHの成長要件に関する研究は、このAMEBAの持続的な増殖に不可欠であることを示しています:鉄、グルコース、ビオチン、葉酸、ナイアシンアミド、パントテネート、ピリドキサル、リボフラビン、チアミン、システイン、アンモニウム部分(システインに存在するものに加えて)、ウシ血清アルブミン、リポタンパク質コレステロール、およびカゼインペプトン透析剤。
ヒトの腸内病原体であるEntamoeba histolytica、および爬虫類のAmebae E. Barreti、E。Invadens、およびE. Terrapinaeを栽培するための最初の血清フリーの部分的に定義された培地(PDM-805)について説明します。PDM-805は、これらの寄生虫の軸培養に広く使用されている媒体であるTYI-S-33の酵母抽出物、ウシ血清、およびカゼインペプトンダイジェストの段階的な置換により開発されました。定義された成分には、アミノ酸、炭水化物、ビタミンB、アスコルビン酸、トコフェロール、チオクチン酸、核酸前駆体、微量金属、リン酸緩衝液が含まれます。未定義の成分には、高度に精製されたウシ血清アルブミン、ウシ血清のリポタンパク質コレステロール溶液、およびカゼインペプトンから調製された3,500未満の分子量を有する透析可能なオートクレーブ可能な水溶性成長因子が含まれます。これまで、E。histolytica、株200:NIHの成長要件に関する研究は、このAMEBAの持続的な増殖に不可欠であることを示しています:鉄、グルコース、ビオチン、葉酸、ナイアシンアミド、パントテネート、ピリドキサル、リボフラビン、チアミン、システイン、アンモニウム部分(システインに存在するものに加えて)、ウシ血清アルブミン、リポタンパク質コレステロール、およびカゼインペプトン透析剤。
We describe the first serum-free, partly defined medium (PDM-805) for cultivating the human enteric pathogen, Entamoeba histolytica, and the reptilian amebae E. barreti, E. invadens, and E. terrapinae. PDM-805 was developed by the stepwise replacement of yeast extract, bovine serum, and a casein peptone digest in TYI-S-33, a medium widely used for the axenic cultivation of these parasites. The defined components include amino acids, carbohydrates, B vitamins, ascorbic acid, tocopherol, thioctic acid, nucleic acid precursors, trace metals, and phosphate buffers. The undefined components include a highly purified bovine serum albumin, a lipoprotein-cholesterol solution from bovine serum, and a dialyzable, autoclavable, water-soluble growth factor(s) having a molecular weight of less than 3,500 prepared from casein peptone. To date, studies on the growth requirements of E. histolytica, strain 200:NIH, show the following are essential for sustained multiplication of this ameba: iron, glucose, biotin, folic acid, niacinamide, pantothenate, pyridoxal, riboflavin, thiamine, cysteine, an ammonium moiety (in addition to that present in cysteine), bovine serum albumin, lipoprotein-cholesterol, and casein peptone dialysate.
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