デキサメタゾン誘発性胸腺アポトーシスにおけるCPLA2阻害の関与

さまざまな分子メカニズムが、デキサメタゾン誘発性胸腺細胞アポトーシスに関与することが示唆されています。この研究では、マウス胸腺細胞における細胞質PLA2の薬理学的阻害は、アラキドニルトリフルオロメチルケトン（AACOCF3）（10ミクロム）およびパルミトイルトリフルオロメチルケトン（PACOCF3）（10ミクロム）を誘発したa弾性増加の酸素増加の樹脂腫性の増加を誘発したアラキドニルトリフルオロメチルケトン（10ミクロム）およびパルミトイルトリフルオロメチルケトン（PACOCF3）と18時間、薬理学的阻害を示しています。Dex（10（-7）M）治療に続いて、P-Bromphenacyl Bromide（PBPB）（20 microM）による分泌PLA2の阻害はそうではありませんでした。Dex誘発性胸腺細胞アポトーシスと同様に、AACOCF3誘発性胸腺アポトーシスは、PI-PLCBETA阻害剤U73122を使用した細胞前処理により除去されましたが、PC-PLC阻害剤D609ではありませんでした。これらの観察結果は、DEXのようなAACOCF3のDAG生成の急速かつ一時的な増加を誘導する能力によって裏付けられました。さらに、AACOCF3誘発アポトーシスは、AACOCF3へのチモシテ曝露後の細胞抽出物の測定とモネンシン能力によって評価される細胞抽出物の測定によって評価されるように、酸性スフィンゴミエリナーゼ（Asmase）の活性化ではなく、中性スフィンゴミエリナーゼ（NSMase）の活性化に関与しました。AACOCF3誘発性胸腺細胞アポトーシス。さらに、AACOCF3アポトーシス効果は、セラミドレベルの早期増加をもたらしました。AACOCF3誘発性胸腺アポトーシスには、カスパーゼ3の活性化が含まれ、カスパーゼ3阻害剤による細胞前処理はAACOCF3誘発アポトーシスを予防しました。これらの観察結果は、CPLA2阻害がDex誘発性胸腺細胞アポトーシスに役割を果たし、胸腺細胞生存におけるCPLA2活性の重要性を強調することを示唆しています。

Various molecular mechanisms have been suggested to be involved in dexamethasone induced thymocyte apoptosis. In this study we show that pharmacological inhibition of cytoplasmic PLA2 in mouse thymocytes for 18 h with arachidonyl trifluoromethyl ketone (AACOCF3) (10 microM) and palmitoyl trifluoromethyl ketone (PACOCF3) (10 microM) induced a drastic increase of thymocyte apoptosis comparable to that observed following Dex (10(-7) M) treatment, while inhibition of secretory PLA2 with p-bromophenacyl bromide (pBPB) (20 microM) did not. AACOCF3-induced thymocyte apoptosis, similarly to Dex-induced thymocyte apoptosis, was eliminated by cell pre-treatment with the PI-PLCbeta inhibitor, U73122, but not by the PC-PLC inhibitor D609. These observations were corroborated by the ability of AACOCF3, like Dex, to induce a rapid and transient increase in DAG generation. In addition, AACOCF3-induced apoptosis involved the activation of the acidic sphingomyelinase (aSMase) but not of the neutral sphingomyelinase (nSMase), as evaluated by measurements of enzyme activity in cell extracts following thymocyte exposure to AACOCF3 and by the ability of monensin to inhibit AACOCF3-induced thymocyte apoptosis. In addition, the AACOCF3 apoptotic effect resulted in an early increase of ceramide levels. AACOCF3-induced thymocyte apoptosis involved the activation of caspase 3, and cell pre-treatment with a caspase 3 inhibitor prevented AACOCF3-induced apoptosis. These observations suggest that cPLA2 inhibition may have a role in Dex-induced thymocyte apoptosis and highlight the importance of cPLA2 activity in thymocyte survival.