C/EBP相同性タンパク質（CHOP）は、転写因子4（ATF4）の活性化と相互作用し、アスパラギンシンテターゼ遺伝子のストレス依存性誘導を負に調節します。

ストレス誘発転写因子であるC/EBP相同性タンパク質（CHOP）は、転写調節、細胞周期、およびアポトーシスに関与しています。現在の研究では、CHOPが酵母の2ハイブリッドスクリーニングでの活性化転写因子（ATF）4の相互作用パートナーとして特定され、HEK293T細胞での相互作用を確認しました。チョップタンパク質レベルは、アミノ酸の剥離中に控えめかつ一時的に上昇しましたが、小胞体ストレスはCHOPタンパク質のはるかに高い持続的な発現を引き起こしました。外因性のチョップ発現は、アミノ酸欠乏によるTRB3遺伝子誘導を強化しました。逆に、CHOPは内因性アスパラギンシンテターゼ（ASNS）遺伝子の誘導を抑制し、ATF4またはアミノ酸欠乏による活性化後のASNSプロモーターによって駆動されるレポーター遺伝子から転写を阻害しました。CHOPの短い干渉RNA媒介ノックダウンは、アミノ酸欠乏または小胞体ストレスのいずれかによってASNの誘導をさらに強化しました。ASNS遺伝子のCHOP依存性抑制は、CHOP Leucine ZipperドメインによるATF4の単純な隔離の可能性に反対してCHOPタンパク質全体を必要とし、クロマチン免疫沈降分析はASNSおよびTRB3プロモーターとのCHOPの関連を示しました。興味深いことに、クロマチン免疫沈降は、外因性CHOP過剰発現後の発現に有意な影響はないにもかかわらず、CHOPがSNAT2、VEGF、およびCAT-1遺伝子のC/EBP-ATF複合部位領域と関連していることも示しました。まとめて、結果は、CHOPがASNなどの特定のC/EBP-ATF含有遺伝子のストレス誘発性調節を制御する転写因子ネットワークのメンバーであることを文書化しています。

C/EBP homology protein (CHOP), a stress-induced transcription factor, is involved in transcriptional regulation, cell cycle, and apoptosis. The present studies identified CHOP as an interacting partner of activating transcription factor (ATF) 4 in a yeast two-hybrid screen and confirmed their interaction in HEK293T cells. CHOP protein levels rose modestly and transiently during amino acid deprivation, whereas endoplasmic reticulum stress caused a much higher and sustained expression of CHOP protein. Exogenous CHOP expression enhanced the TRB3 gene induction by amino acid deprivation. Conversely, CHOP suppressed the induction of the endogenous asparagine synthetase (ASNS) gene and inhibited transcription from a reporter gene driven by the ASNS promoter following activation by ATF4 or amino acid deprivation. Short interfering RNA-mediated knockdown of CHOP further enhanced the induction of ASNS by either amino acid deprivation or endoplasmic reticulum stress. The CHOP-dependent repression of the ASNS gene required the entire CHOP protein, arguing against the possibility of simple sequestration of ATF4 by the CHOP leucine zipper domain, and chromatin immunoprecipitation analysis showed association of CHOP with the ASNS and TRB3 promoters. Interestingly, chromatin immunoprecipitation also showed that CHOP was associated with the C/EBP-ATF composite site regions of the SNAT2, VEGF, and CAT-1 genes, despite no significant effect on their expression after exogenous CHOP overexpression. Collectively, the results document that CHOP is a member of the transcription factor network that controls the stress-induced regulation of specific C/EBP-ATF-containing genes, such as ASNS.