DNA損傷認識タンパク質は、細胞核の重いイオン誘導トラックに沿って局在する

高線形エネルギー移動（LET）放射線誘発DNA損傷に関与する修復ダイナミクスを識別するために、鉄イオンへの細胞曝露後にホスホ-H2AX（gammah2ax）焦点形成を分析しました（Fe-ions、500 Mev U（-1）、200kev microM（-1））。DNA損傷部位に位置する病巣は、免疫細胞化学的方法を使用して視覚化されました。H2AXは放射線誘発性二重鎖切断部位（DSB）でリン酸化されるため、Gammah2ax病巣を使用して、さまざまな用量の電離放射線にさらされた後、DSBによって形成されたトラックを検出または照らしました。ATM Phospho-Serine 1981、DNA-PKCSホスホ - スレオニン2609、NBS1ホスホセリン343およびCHK2ホスホ - スレオニン68などの追加のDSB認識タンパク質は、高LET放射線誘発DSBでGammah2Axと共局在しています。さらに、Feイオン誘導病巣は、X放射線誘発焦点よりも長い間留まりました。これらの発見は、Feイオン誘発性の損傷が、おそらくFeイオン誘発損傷または病変がより複雑または広範囲に及ぶため、X放射線誘発性の損傷よりもゆっくりと修復されることを示唆しています。これらすべてのリン酸化DNA DSB認識タンパク質に対する抗体は、DSBの検出と局在化に非常に効果的であると思われます。

To identify the repair dynamics involved in high linear energy transfer (LET) radiation-induced DNA damage, phospho-H2AX (gammaH2AX) foci formation was analyzed after cellular exposure to iron ions (Fe-ions, 500 MeV u(-1), 200 KeV microm(-1)). The foci located at DNA damage sites were visualized using immunocytochemical methods. Since H2AX is phosphorylated at sites of radiation-induced double strand breaks (DSB), gammaH2AX foci were used to detect or illuminate tracks formed by DSB after exposure to various doses of ionizing radiation. Additional DSB-recognition proteins such as ATM phospho-serine 1981, DNA-PKcs phospho-threonine 2609, NBS1 phospho-serine 343 and CHK2 phospho-threonine 68 all co-localized with gammaH2AX at high LET radiation induced DSB. In addition, Fe-ion induced foci remained for longer times than X-radiation induced foci. These findings suggest that Fe-ion induced damage is repaired more slowly than X-radiation induced damage, possibly because Fe-ion induced damage or lesions are more complex or extensive. Antibodies for all these phosphorylated DNA DSB recognition proteins appear to be very effective for the detection and localization of DSB.