結腸直腸癌組織におけるCD8+CD25+FOXP3+抑制T細胞の同定

背景：抗腫瘍免疫応答は、結腸直腸癌（CRC）の結果の決定要因の1つです。最近の研究では、FOXP3（+）CD25（+）CD4（+）調節T細胞（T4REG）が、新興癌細胞の効果的な免疫サーンスを妨げ、確立された腫瘍に対する効果的な免疫応答を妨げる可能性があることを示唆しています。この記述的研究では、CRC患者の血液および組織調節T細胞集団を分析しました。 方法：CRCの40人の患者からの血液および組織調節FOXP3（+）T細胞は、正常な結腸組織からの調節FOXP3（+）T細胞と26人の健康なボランティアの血液から比較されました。フローサイトメトリーを使用して、すべてのFOXP3（+）T細胞集団を定量化および表現しました。腫瘍段階と微小侵襲的状態に相関が求められました。調節FOXP3（+）T細胞の抑制能力は、in vitroでのCD4（+）CD25（ - ）T細胞増殖に対する効果と、従来のT細胞によるサイトカイン産生を阻害する能力によって評価されました。 結果：血液およびCRC組織におけるCD8（+）CD25（+）FOXP3（+）細胞（T8REG）の大幅な増加が見つかりました。それらの表現型はT4REGの表現型に近かった。細胞毒性Tリンパ球関連抗原-4、グルココルチコイド誘発腫瘍壊死因子関連タンパク質、および正常な自己菌の結腸組織からのT8REGと比較した形質転換成長因子（TGF）BETA1発現によって示唆されるように、T8REG細胞浸潤CRCが活性化されました。さらに、T8REGはCD4（+）CD25（ - ）T細胞増殖とTh1サイトカイン産生の生体を抑制することができ、腫瘍浸潤T8REGが強い抑制能力を持っていることを示しています。T8REG数は、腫瘍の病期と微小侵襲的状態と相関していました。最後に、インターロイキン6およびTGFベータ1は、CD8（+）CD25（+）FOXP3（+）T細胞Ex vivoの生成を相乗的に誘導しました。 結論：結腸直腸腫瘍の新しい調節T細胞集団（CD8（+）FOXP3（+））を特定しました。癌組織からの分離後、これらのCD8（+）FOXP3（+）細胞は、in vitroで強い免疫抑制特性を示しました。これらのデータは、これらの細胞が腫瘍免疫脱出と疾患の進行に寄与する可能性があることを示唆しています。

BACKGROUND: The antitumoral immune response is one determinant of colorectal cancer (CRC) outcome. Recent work suggests that Foxp3(+)CD25(+)CD4(+) regulatory T cells (T4reg) might hamper effective immunosurveillance of emerging cancer cells and impede effective immune responses to established tumours. In this descriptive study, we analysed blood and tissue regulatory T cell populations in patients with CRC. METHODS: Blood and tissue regulatory Foxp3(+) T cells from 40 patients with CRC were compared to regulatory Foxp3(+) T cells from normal colonic tissue and from blood of 26 healthy volunteers. Flow cytometry was used to quantify and phenotype all Foxp3(+) T cell populations. Correlations were sought with the tumour stage and with micro-invasive status. The suppressive capacity of regulatory Foxp3(+) T cells was assessed by their effect on CD4(+)CD25(-) T cell proliferation in vitro and by their capacity to inhibit cytokine production by conventional T cells. RESULTS: We found a significant increase of CD8(+)CD25(+)Foxp3(+) cells (T8reg) in blood and CRC tissue; their phenotype was close to that of T4reg. T8reg cells infiltrating CRC were activated, as suggested by increased cytoxic T lymphocyte-associated antigen-4, glucocorticoid-induced tumour necrosis factor-related protein, and transforming growth factor (TGF)beta1 expression compared to T8reg from normal autologous colonic tissue. Moreover, T8reg were able to suppress CD4(+)CD25(-) T cell proliferation and Th1 cytokine production ex vivo, demonstrating that tumour-infiltrating T8reg have strong suppressive capacities. T8reg numbers correlated with the tumour stage and with micro-invasive status. Finally, interleukin 6 and TGF beta 1 synergistically induced the generation of CD8(+)CD25(+)Foxp3(+) T cells ex vivo. CONCLUSIONS: We have identified a new regulatory T cell population (CD8(+)Foxp3(+)) in colorectal tumours. After isolation from cancer tissue these CD8(+)Foxp3(+) cells demonstrated strong immunosuppressive properties in vitro. These data suggest that these cells may contribute to tumoral immune escape and disease progression.