Nisiを介したニシン免疫を取り入れると、乳酸酸菌におけるベクターベースのニシン制御遺伝子発現が改善されます

乳酸菌（LAB）は、風味活性タンパク質から抗生物質ペプチドおよび経口ワクチンに至るまで、多種多様な組換えタンパク質を発現するために成功裏に使用されています。ニシン制御された発現（NICE）システムは、研究室で異種タンパク質を生産するためのシステムの中で最も一般的です。素敵なシステムの以前の最適化により、宿主細胞の培養によって容認できるインデューサーニシンの濃度に強い限界が明らかになりました。この研究では、ニシン免疫遺伝子であるNISIが、高コピーの大腸菌ラブシャトルベクターに完全な素敵なシステムを含む最近報告されたPMSP3535H2ベクターに挿入されています。FEDバッチ発酵データは、新しいベクターであるPMSP3535H3とともに変換されたLactococcus lactis IL1403細胞が、誘導性ニシンの濃度の5倍の増加に耐え、この濃度の上昇で1.8倍増加した緑色蛍光レベルの増加を生成することを示しています。タンパク質（GFP）、モデル組換えタンパク質。したがって、ここで説明するPMSP3535H3のNICEシステムにNISIを組み込むことで、研究室での組換えタンパク質発現を最適化する過程で研究される新しい誘導パラメーターの範囲が明らかになります。

Lactic acid bacteria (LAB) have been used successfully to express a wide variety of recombinant proteins, ranging from flavor-active proteins to antibiotic peptides and oral vaccines. The nisin-controlled expression (NICE) system is the most prevalent of the systems for production of heterologous proteins in LAB. Previous optimization of the NICE system has revealed a strong limit on the concentration of the inducer nisin that can be tolerated by the culture of host cells. In this work, the nisin immunity gene, nisI, has been inserted into the recently reported pMSP3535H2 vector that contains the complete NICE system on a high-copy Escherichia coli-LAB shuttle vector. Fed-batch fermentation data show that Lactococcus lactis IL1403 cells transformed with the new vector, pMSP3535H3, tolerate a 5-fold increase in the concentration of the inducer nisin, and, at this elevated concentration, produce a 1.8-fold increased level of green fluorescent protein (GFP), a model recombinant protein. Therefore, the incorporation of nisI in the pMSP3535H3 NICE system described here unveils new ranges of induction parameters to be studied in the course of optimizing recombinant protein expression in LAB.