IFN-GAMMAのヒト単球細胞株（THP-1）プライミング効果におけるIFN-GAMMAおよび腫瘍壊死因子αによるIL-6およびIL-6受容体変調

現在の研究は、ヒト単球THP-1細胞におけるIFN-GAMMAおよびTNF-alphaトリガーIL-6分泌およびIL-6遺伝子発現のメカニズムの詳細な研究であり、ILの発現に対するこれらのサイトカインの効果の影響-6表面受容体およびIL-6R遺伝子。TNF-alphaは、単球Thp-1細胞の線維芽細胞におけるIL-6発現を刺激することが示されていますが、TNFがIL-6発現を誘導するためにIFN-GAMMAが必要です。ここで報告された結果は、THP-1細胞のIFN-GAMMA + TNF-alpha誘導IL-6 mRNA発現との組み合わせ処理が、どちらのサイトカイン単独でも有意な誘導は得られなかったことを示しています。核ランオン転写アッセイは、IFN-GAMMA + TNF-αによって誘導されるIL-6 mRNAのレベルの増加が、遺伝子転写の誘導と関連していることを示した。IFN-GAMMAによるTHP-1細胞の連続刺激、およびその後TNF-alphaによると、IL-6遺伝子誘導は許可されず、IFN-GAMMAとTNF-alphaがIL-6をトリガーするために一緒に作用する異なるシグナル伝達因子を誘導または活性化したことを示唆しています。遺伝子転写。IFN-GAMMA前処理に続いて、IFN-Gamma + TNF-alphaの再刺激が続き、IL-6分泌活性の付随的な増加を伴うIL-6遺伝子発現の過剰誘導をもたらしました。IFN-GAMMAのこのプライミング効果は、活性タンパク質合成に依存しています。ウエスタンブロッティングおよびアフィニティクロマトグラフィーによってTHP-1細胞によって分泌されたIL-6タンパク質の生化学的特性評価により、42 kDaの主要なIL-6分子種と23 kDaのマイナーを特定することができました。さらに、IFN-GAMMAは、IL-6R mRNAレベルを増加させ、表面受容体へのIL-6特異的結合の付随的な増加を示したことを示しました。それどころか、IFN-GAMMA + TNF-alphaによる治療は、おそらくリガンド媒介効果により、おそらくTHP-1細胞へのIL-6R mRNAおよびIL-6結合のレベルを低下させました。まとめると、ここで報告された結果は、IFN-GammaとTNF-alphaの間の機能的相互作用が単球細胞におけるIL-6およびIL-6R発現の調節に関与しているという証拠を提供します。IL-6生産とIL-6R発現の制御は、IFN-Gammaの重要な恒常性特性の1つである可能性があります。

The present work is a detailed study of the mechanism of IFN-gamma- and TNF-alpha-triggered IL-6 secretion and IL-6 gene expression in human monocytic THP-1 cells and of the effect of these cytokines on the expression of IL-6 surface receptor and IL-6R gene. Although TNF-alpha was shown to stimulate IL-6 expression in fibroblasts in monocytic THP-1 cells, IFN-gamma is required for TNF to induce IL-6 expression. The results reported here demonstrate that combined treatment of THP-1 cells with IFN-gamma + TNF-alpha induced IL-6 mRNA expression, whereas no significant induction was obtained by either cytokine alone. Nuclear run-on transcription assay showed that the increased level of IL-6 mRNA induced by IFN-gamma + TNF-alpha was associated with induction of gene transcription. Sequential stimulation of THP-1 cells by IFN-gamma and subsequently by TNF-alpha did not allow IL-6 gene induction, suggesting that IFN-gamma and TNF-alpha induced or activated different signaling factors which should act together to trigger IL-6 gene transcription. IFN-gamma pretreatment followed by IFN-gamma + TNF-alpha restimulation led to superinduction of the IL-6 gene expression with a concomitant increase in IL-6-secreted activity. This priming effect of IFN-gamma is dependent on active protein synthesis. Biochemical characterization of IL-6 proteins secreted by THP-1 cells by Western blotting and affinity chromatography allowed identification of a major IL-6 molecular species of 42 kDa and a minor one of 23 kDa. Furthermore, we showed here that IFN-gamma increased the IL-6R mRNA level with a concomitant increase in IL-6-specific binding to surface receptors. On the contrary, treatment with IFN-gamma + TNF-alpha reduced the level of IL-6R mRNA and IL-6 binding to THP-1 cells probably due to a ligand-mediated effect. Taken together, results reported here provide evidence that functional interaction between IFN-gamma and TNF-alpha is involved in the regulation of IL-6 and IL-6R expression in monocytic cells. Control of IL-6 production and IL-6R expression may be one of the important homeostatic properties of IFN-gamma.