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背景と目的：骨髄（BM）または末梢血（PB）単核細胞（MNC）のいずれかの自己移植は、末梢動脈閉塞性疾患患者の治療的血管新生を誘導します。しかし、BMまたはPBから取得し、これらの治療戦略で使用されている細胞産物の正確な性質は不明のままです。 材料と方法：我々は、BM-MNCによって治療された16人とPB-MNCによって8人の個人を含む細胞療法の臨床試験で、動員なしで収集され、重大な四肢虚血患者に収集され、埋め込まれたBM-MNCおよびPB-MNCの特性を分析しました。これらのMNCは、フローサイトメトリーによる細胞数、生存率評価、白血球サブセット、CD34 STEMおよび内皮前駆細胞（EPCS）（CD34+/CD133+/VEGF-R2+）の列挙によって特徴付けられました。CD34、CD133、およびVEGF-R2マーカーについて、平均蛍光強度比を決定しました。すべての分析は、2つの研究所で同時に実行されました。 結果：両方の研究所間の精度と信頼性が達成されました。BM-MNCとPB-MNCは定量的かつ定性的に不均一であり、互いにまったく異なっていました。幹細胞とEPCは、PB細胞産物と比較してBMに有意に存在していましたが、平均蛍光強度比が同様でした。CD34+細胞数とEPCSレベルの間に弱い正の相関が観察され、細胞識別の特異性が確認されました。 結論：細胞産物の特性には、その起源に応じて、また個人間で大きな変動が観察されました。これらのデータは、特に多室中心の臨床試験における細胞産物の最適な特性評価の必要性を強調しています。
背景と目的：骨髄（BM）または末梢血（PB）単核細胞（MNC）のいずれかの自己移植は、末梢動脈閉塞性疾患患者の治療的血管新生を誘導します。しかし、BMまたはPBから取得し、これらの治療戦略で使用されている細胞産物の正確な性質は不明のままです。 材料と方法：我々は、BM-MNCによって治療された16人とPB-MNCによって8人の個人を含む細胞療法の臨床試験で、動員なしで収集され、重大な四肢虚血患者に収集され、埋め込まれたBM-MNCおよびPB-MNCの特性を分析しました。これらのMNCは、フローサイトメトリーによる細胞数、生存率評価、白血球サブセット、CD34 STEMおよび内皮前駆細胞（EPCS）（CD34+/CD133+/VEGF-R2+）の列挙によって特徴付けられました。CD34、CD133、およびVEGF-R2マーカーについて、平均蛍光強度比を決定しました。すべての分析は、2つの研究所で同時に実行されました。 結果：両方の研究所間の精度と信頼性が達成されました。BM-MNCとPB-MNCは定量的かつ定性的に不均一であり、互いにまったく異なっていました。幹細胞とEPCは、PB細胞産物と比較してBMに有意に存在していましたが、平均蛍光強度比が同様でした。CD34+細胞数とEPCSレベルの間に弱い正の相関が観察され、細胞識別の特異性が確認されました。 結論：細胞産物の特性には、その起源に応じて、また個人間で大きな変動が観察されました。これらのデータは、特に多室中心の臨床試験における細胞産物の最適な特性評価の必要性を強調しています。
BACKGROUND AND OBJECTIVES: Autologous transplantation of either bone marrow (BM) or peripheral blood (PB) mononuclear cells (MNC) induces therapeutic angiogenesis in patients with peripheral arterial occlusive disease. Yet, the precise nature of the cellular product obtained from BM or PB and used in these therapeutic strategies remains unclear. MATERIALS AND METHODS: We have analysed the characteristics of BM-MNC and PB-MNC collected without mobilization and implanted in patients with critical limb ischaemia in a clinical trial of cellular therapy including 16 individuals treated by BM-MNC and eight by PB-MNC. These MNCs were characterized by cell counts, viability assessment and enumeration of leucocyte subsets, CD34 stem and endothelial progenitor cells (EPCs) (CD34+/CD133+/VEGF-R2+) by flow cytometry. Mean fluorescence intensity ratios were determined for CD34, CD133 and VEGF-R2 markers. All analyses were simultaneously performed in two laboratories. RESULTS: Accuracy and reliability between both laboratories were achieved. BM-MNCs and PB-MNCs were quantitatively and qualitatively heterogeneous and quite different from each other. Stem cells and EPCs were significantly more present in BM- compared to PB-cell products, but with similar mean fluorescence intensity ratios. A weakly positive correlation was observed between CD34+ cell counts and EPCs levels, confirming the specificity of cell identification. CONCLUSION: A great variability was observed in cell product characteristics according to their origin and also between individuals. These data stress the necessity of optimal characterization of cell products especially in multicentric clinical trials.
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