ニシン制御遺伝子発現システムによるニシン産生株の同定

ニシン産生株を識別する特定の方法は、ニシン制御遺伝子発現（NICE）ベクターPSEC：NUCに基づいて開発されました。プラスミドPSEC：NUCは、ニースシステムに一般的に使用される宿主である非ニシン産生株Lactococcus Lactis NZ9000に変換されました。生成株L. lactis NZ9000/psec：nucは細胞外誘導性ニシンを感知し、レポータータンパク質nuc、ブドウ球菌ヌクレアーゼ（NUC）を培地に効率的に分泌する可能性があります。精製されたニシンを使用する代わりに、ニシン産生株の培養上清も誘導者として使用されました。したがって、素敵なシステムを使用して、ニシン生産株を識別できます。この原則により、生乳から分離された56個の乳酸菌株のうち4がニシン生産者として特定されました。結果は、テンプレートとしてゲノムDNAを使用したポリメラーゼ連鎖反応増幅によってさらに確認され、ヌクレオチドシーケンスにより3つがニシンAが生成され、他のものがニシンZが生成されたことが明らかになりました。すてきなシステムを迅速に使用します。

A specific method to identify nisin-producing strains was developed based on Nisin-Controlled gene Expression (NICE) vector pSec:Nuc. The plasmid pSec:Nuc was transformed into non-nisin-producing strain Lactococcus lactis NZ9000, a host commonly used for the NICE system. The generating strain L. lactis NZ9000/pSec:Nuc could sense extracellular inducer nisin and efficiently secrete a reporter protein Nuc, the staphylococcal nuclease (Nuc) into the medium. Instead of using purified nisin, the culture supernatants of nisin-producing strains were also used as inducers. Therefore, the NICE system could be used to identify nisin-producing strains. With this principle, 4 among 56 lactococci strains isolated from raw milk were identified as nisin producers. The results were further confirmed by polymerase chain reaction amplification with their genomic DNA as templates, and nucleotide sequencing revealed that three of them produced nisin A, and the others produced nisin Z. Those results made it possible to isolate and identify nisin-producing strains specifically and rapidly using NICE system.