ヒストンH2AXは、NBS1との相互作用を通じてDNA損傷誘発ATM活性化に関与します

DNA二本鎖切断（DSB）に対するDNA損傷応答タンパク質の動員におけるリン酸化ヒストンH2AX（gamma-H2AX）機能は、DSB修復を促進します。ATMはまた、自動リン酸化に続いてDSBサイトでGamma-H2AXと共局在します。ただし、Gamma-H2AXがATM依存性細胞周期チェックポイントの活性化に役割を果たしているかどうかは不明です。ここでは、ATMとNBS1がガンマ-H2AX依存的に損傷したクロマチンに動員されることを示します。リン酸化ATMとATM依存性のリン酸化の焦点形成は、H2AXノックダウン細胞で抑制されます。さらに、抗ガンマ-H2AX抗体は、in vitroおよび組換えH2AXでATM様タンパク質キナーゼ活性を共免疫沈殿させ、非照射細胞からATMのin vitroキナーゼ活性を増加させます。さらに、H2AX欠損細胞は、ATM依存性細胞周期チェックポイントに欠陥を示しました。まとめると、Gamma-H2AXは、NBS1を介したATM関連損傷応答の効果的なDSB依存性の活性化に重要な役割を果たします。

Phosphorylated histone H2AX (gamma-H2AX) functions in the recruitment of DNA damage response proteins to DNA double-strand breaks (DSBs) and facilitates DSB repair. ATM also co-localizes with gamma-H2AX at DSB sites following its auto-phosphorylation. However, it is unclear whether gamma-H2AX has a role in activation of ATM-dependent cell cycle checkpoints. Here, we show that ATM as well as NBS1 is recruited to damaged-chromatin in a gamma-H2AX-dependent manner. Foci formation of phosphorylated ATM and ATM-dependent phosphorylation is repressed in H2AX-knockdown cells. Furthermore, anti-gamma-H2AX antibody co-immunoprecipitates an ATM-like protein kinase activity in vitro and recombinant H2AX increases in vitro kinase activity of ATM from un-irradiated cells. Moreover, H2AX-deficient cells exhibited a defect in ATM-dependent cell cycle checkpoints. Taken together, gamma-H2AX has important role for effective DSB-dependent activation of ATM-related damage responses via NBS1.