8-アジドアデニンを介したDNAタンパク質複合体の紫外線架橋

8-アジド-2'-デオキシアデノシン-5'-三リン酸の合成が記載されています。光反応性DATPアナログは、薄層クロマトグラフィーとUV分光法によって特徴付けられました。紫外線照射時の光反応性が研究されました。TET演算子シーケンスを含むDNAへのニック翻訳によるこのDATPアナログの組み込み後、TETオペレーターDNAとTETリプレッサー間の相互作用の調査が可能になります。タンパク質のDNAへの光分類は、SDSポリアクリルアミドゲル電気泳動におけるDNAタンパク質架橋の移動の減少によって実証されました。

The synthesis of 8-azido-2'-deoxyadenosine-5'-triphosphate is described. The photoreactive dATP analog was characterized by thin layer chromatography and UV spectroscopy. Its photoreactivity upon UV irradiation was studied. After incorporation of this dATP analog by nick translation into DNA containing the tet operator sequence the investigation of the interactions between tet operator DNA and Tet repressor becomes possible. Photocrosslinking of protein to DNA was demonstrated by the reduced migration of the DNA protein crosslinks in SDS polyacrylamide gel electrophoresis.