ウロキナーゼ型プラスミノーゲン活性化因子受容体を標的とするRNAiは、in vivoでの経口扁平上皮癌の転移と進行を阻害します

ウロキナーゼ型プラスミノーゲン活性化因子受容体（U-PAR）は、口腔扁平上皮癌（OSCC）を含む多くのヒト悪性腫瘍で過剰発現し、汎用性のあるシグナル伝達器としてのさまざまな癌の重要な細胞イベントで重要な役割を果たすことが認められています。私たちの研究では、U-PAR特異的なsiRNAを発現するレトロウイルスベクターをヌードマウスのOSCC異種移植片に注入して、OSCCに対する阻害効果を観察しました。我々のデータは、U-PARを標的とするsiRNAが腫瘍の成長を著しく抑制し、増殖関連遺伝子、KI-67および細胞アポトーシスの増加を減少させ、OSCCにおける内因性U-PAR発現の効率的かつ特異的な阻害を伴うことを示しています。さらに重要なことに、口腔がんの浸潤と転移に密接に関与しているMMP-2、MMP-9、VEGF-C、VEGF-D、およびVEGFR-3のmRNAおよびタンパク質発現は、定量的リアルタイムRT-PCR、西部のブロット、免疫ゆがみによって測定されたと同時に著しくダウンレギュレートされました。また、ゼラチンとフィブリンザイモグラフィーは、MMP-9、MMP-2、およびU-PA酵素活性が、対照群と比較して、U-Par特異的siRNAグループで有意に減少したことを示しました。さらに、薬剤耐性に関連するMDR-1遺伝子の発現は、U-PARのサイレンシングによって明らかに阻害されました。これらの発見は、U-PARを標的とするRNAIがin vivoでのOSCCの転移と進行を効果的に阻害する可能性があることを示唆しています。したがって、特に癌細胞の浸潤と転移を阻害および予防する際に、口腔がんの強力かつ特定の治療として使用される場合があります。

It has been admitted that urokinase-type plasminogen activator receptor (u-PAR) is overexpressed in many human malignant tumors including oral squamous cell carcinoma (OSCC) and plays an important role in a variety of cancer key cellular events as a versatile signaling orchestrator. In our study, a retroviral vector expressing u-PAR-specific siRNA was injected into OSCC xenografts of nude mice to observe its inhibitory effects on OSCC. Our data demonstrate that siRNA targeting u-PAR markedly suppressed tumor growth, reduced the expression of proliferation-related gene, Ki-67 and increased cell apoptosis, accompanying with the efficient and specific inhibition of endogenous u-PAR expression in OSCC. More importantly, the mRNA and protein expression of MMP-2, MMP-9, VEGF-C, VEGF-D and VEGFR-3 that are intimately involved in oral cancer invasion and metastasis, was simultaneously downregulated significantly as determined by quantitative real-time RT-PCR, Western blot and immunohistochemistry; and Gelatin and fibrin zymography showed that MMP-9, MMP-2 and u-PA enzymatic activities were significantly reduced in u-PAR-specific siRNA group, compared to those in control groups. In addition, the expression of MDR-1 gene related to drug resistance was obviously inhibited by silencing of u-PAR. These findings suggest that RNAi targeting u-PAR could effectively inhibit the metastasis and progression of OSCC in vivo. Thus, it may be used as a potent and specific therapy for oral cancer, especially in inhibiting and preventing cancer cell invasion and metastasis.