SF2/ASFは、翻訳開始メカニズム間のバランスに影響を与えることにより、プロテオームの多様性を調節します

セリン/アルギニンが豊富なスプライシング調節タンパク質、その中にはSF2/ASFをシャトリングするサブセットについて、スプライシング後の活動が報告されています。成長因子は、フィブロネクチンEDAエクソンの代替スプライシングを修正するだけでなく、SF2/ASFのEDA結合モチーフを含むレポーターmRNAのin vivo翻訳を変更し、2つの共調節レベルの同調レベルのレポーターmRNAのin vivo翻訳でも変化するRAS-PI 3-キナーゼ-AKT/PKBシグナル伝達経路を活性化することを示しました。ほとんどの真核生物mRNAの翻訳は、走査型メカニズムを介して開始され、eIF4Fタンパク質複合体によるmRNA 5'末端でのM7Gキャップの認識を含みます。いくつかのウイルスおよび細胞mRNAは、mRNAに結合する内部リボソームを指示する内部リボソーム侵入部位と呼ばれるCIS作用mRNA要素の作用により、キャップに依存しない方法で翻訳されます。ここでは、2つのオープンリーディングフレームを運ぶmRNAを生成するビシストロンレポーターを使用します。1つはキャップ依存的に翻訳され、もう1つは内部リボソーム入力部位依存性開始によって翻訳され、in vivoの過剰発現がCAP依存性と内部リボソーム依存性翻訳の比率を増加させることを示します。一貫して、SF2/ASFのノックダウンは反対の効果を引き起こします。SF2/ASFの発現レベルの変化は、線維芽細胞成長因子-2をコードする内因性mRNAの代替翻訳にも影響します。これらの結果は、代替翻訳の調節因子としてのSF2/ASFの役割を強く示唆しています。これは、これら2つの翻訳開始メカニズムのバランスによる異なるタンパク質の生成を意味し、SF2/ASFの既知の可能性を拡大して、翻訳分野へのプロテオミクスの多様性を調節します。

Post-splicing activities have been described for a subset of shuttling serine/arginine-rich splicing regulatory proteins, among them SF2/ASF. We showed that growth factors activate a Ras-PI 3-kinase-Akt/PKB signaling pathway that not only modifies alternative splicing of the fibronectin EDA exon, but also alters in vivo translation of reporter mRNAs containing the EDA binding motif for SF2/ASF, providing two co-regulated levels of isoform-specific amplification. Translation of most eukaryotic mRNAs is initiated via the scanning mechanism, which implicates recognition of the m7G cap at the mRNA 5'-terminus by the eIF4F protein complex. Several viral and cellular mRNAs are translated in a cap-independent manner by the action of cis-acting mRNA elements named internal ribosome entry sites that direct internal ribosome binding to the mRNA. Here we use bicistronic reporters that generate mRNAs carrying two open reading frames, one translated in a cap-dependent manner while the other by internal ribosome entry site-dependent initiation, to show that in vivo over-expression of SF2/ASF increases the ratio between cap-dependent and internal ribosome entry site-dependent translation. Consistently, knocking-down of SF2/ASF causes the opposite effect. Changes in expression levels of SF2/ASF also affect alternative translation of an endogenous mRNA, that one coding for fibroblast growth factor-2. These results strongly suggest a role for SF2/ASF as a regulator of alternative translation, meaning the generation of different proteins by the balance among these two translation initiation mechanisms, and expand the known potential of SF2/ASF to regulate proteomic diversity to the translation field.