クルミのナフソキノンであるジュグロンは、培養メラノーマ腫瘍細胞に対する細胞毒性および遺伝毒性効果を発揮します

この研究は、クルミの主要成分であるジュグロンの細胞毒性および遺伝毒性の可能性と、黒色腫細胞に対するその根本的なメカニズムを示しています。MTTアッセイとクローン原性アッセイを使用して、細胞毒性、ミクロナクルスアッセイを研究して、遺伝毒性、グルタチオン（GSH）アッセイ、および2 '、7'-ジコロロオレオレセインジアセテート（DCFH-DA）アッセイを評価して酸化ストレス誘導を評価しました。アポトーシス/壊死誘導は、フローサイトメトリーによって分析されました。乳酸デヒドロゲナーゼレベルの対応する増加により、細胞生存率の濃度依存性の減少が観察されました。微量核核細胞の頻度の用量依存性の増加は、黒色腫腫瘍細胞の細胞遺伝学的損傷を誘発するジャグロンの可能性を示した。さらに、小核研究の結果は、細胞質分裂のブロックされた増殖指数の減少を示すことにより、増殖する細胞集団の分裂遅延を示しました。さらに、ジュグロン誘発性アポトーシスと壊死は、オリゴヌクレオソームのラダー形成、顕微鏡分析、低下葉面画分の増加（DNAヒストグラムのサブゴーピーク）、およびAnnexinv（+）/PI（+）細胞の増加率によって実証される可能性があります。フローサイトメトリーによって検出されます。ジュグロン治療後のグルタチオンレベルの有意な濃度依存性の減少とジクロロフルオレセイン（DCF）蛍光の増加により、ジャグロンが細胞内反応性酸素種を生成する能力が確認されました。ジュグロンの細胞毒性効果は、酸化ストレスの誘導、細胞膜損傷、およびアポトーシスと壊死の両方による細胞死につながる鎖骨形成作用を含むメカニズムに起因する可能性があります。

This study demonstrates cytotoxic and genotoxic potential of juglone, a chief constituent of walnut, and its underlying mechanisms against melanoma cells. MTT assay and clonogenic assay were used to study cytotoxicity, micronucleus assay to assess genotoxicity, glutathione (GSH) assay and 2',7'-dicholorofluorescein diacetate (DCFH-DA) assay to evaluate the oxidative stress induction. Apoptosis/necrosis induction was analysed by flow cytometry. We observed a concentration-dependent decrease in cell survival with a corresponding increase in the lactate dehydrogenase levels. A dose-dependent increase in the frequency of micronucleated binucleate cells indicated the potential of juglone to induce cytogenetic damage in melanoma tumor cells. Moreover, results of the micronuclei study indicated division delay in the proliferating cell population by showing decrease in the cytokinesis blocked proliferation index. Further, juglone-induced apoptosis and necrosis could be demonstrated by oligonucleosomal ladder formation, microscopic analysis, increase in the hypodiploid fraction (sub Go peak in DNA histogram), as well as an increased percentage of AnnexinV(+)/PI(+) cells detected by flow cytometry. A significant concentration-dependent decrease in the glutathione levels and increase in dichlorofluorescein (DCF) fluorescence after juglone treatment confirmed the ability of juglone to generate intracellular reactive oxygen species. The cytotoxic effect of juglone can be attributed to mechanisms including the induction of oxidative stress, cell membrane damage, and a clastogenic action leading to cell death by both apoptosis and necrosis.