肺胞上皮型細胞におけるCREの指示された発現

肺肺胞上皮は、2つの形態学的および機能的に異なる細胞タイプ、肺胞上皮タイプ（AT）IおよびAT2細胞で構成されています。それぞれの細胞タイプに関連する遺伝子の細胞特異的CRE/LOXPを介したノックアウトを持つ遺伝子組み換えマウスは、AT1対AT2細胞の肺胞恒常性への相対的な寄与を解明するのに役立ちます。CREは以前、界面活性剤タンパク質（SP）-Cプロモーターを含むマウス肺のAT2細胞で効率的に発現しています。ただし、AT1細胞でCREを発現するトランスジェニックマウスはこれまで利用できませんでした。AT1細胞特異的トランスジェニックCREマウスを開発するために、内因性アクアポリン5（AQP5）遺伝子のエクソン1にCRE-ARE-ARE-DSREDカセットのノックインを生成しました。マウスの線では、AQP5-CRE-ASR-DSRED（酸）。酸マウスにおける内因性AQP5およびトランスジェニックCREは、RT-PCRによる非常に類似した組織分布を示しました。CRE活性を分析するために、酸を2つのCREレポーター株、R26LACZとMT/Mgに交配しました。二重トランスジェニックの子孫は、遠位肺のAT1細胞の非常に高い割合でレポーター遺伝子発現を実証しましたが、AT2細胞は陰性でした。予想どおり、内因性AQP5が発現する他のいくつかの組織（例えば、顎下唾液腺と胃）で可変レポーターの発現が検出されました。酸マウスは、CRE/LOXPを介した遺伝子欠失技術を伴うin vivoでの肺胞上皮特性に対するAT1細胞の機能的寄与を分析する際に、主要な有用性が必要です。

Pulmonary alveolar epithelium is comprised of two morphologically and functionally distinct cell types, alveolar epithelial type (AT) I and AT2 cells. Genetically modified mice with cell-specific Cre/loxP-mediated knockouts of relevant genes in each respective cell type would be useful to help elucidate the relative contributions of AT1 versus AT2 cells to alveolar homeostasis. Cre has previously been efficiently expressed in AT2 cells in mouse lung with the surfactant protein (SP)-C promoter; however, no transgenic mouse expressing Cre in AT1 cells has so far been available. To develop an AT1 cell-specific transgenic Cre mouse, we generated a knockin of a Cre-IRES-DsRed cassette into exon 1 of the endogenous aquaporin 5 (Aqp5) gene, a gene expressed specifically in AT1 cells in the distal lung epithelium, resulting in the mouse line, Aqp5-Cre-IRES-DsRed (ACID). Endogenous Aqp5 and transgenic Cre in ACID mice showed a very similar pattern of tissue distribution by RT-PCR. To analyze Cre activity, ACID was crossed to two Cre reporter strains, R26LacZ and mT/mG. Double-transgenic offspring demonstrated reporter gene expression in a very high fraction of AT1 cells in the distal lung, whereas AT2 cells were negative. As expected, variable reporter expression was detected in several other tissues where endogenous Aqp5 is expressed (e.g., submandibular salivary gland and stomach). ACID mice should be of major utility in analyzing the functional contribution of AT1 cells to alveolar epithelial properties in vivo with Cre/loxP-mediated gene deletion technology.