フォトバクテリウムleiognathi株Jt-shiz-119からクローン化されたアルファ2,6-シアリルトランスフェラーゼは、シアリルトランスフェラーゼとニューラミニダーゼ活性の両方を示しています

フォトバクテリウムleiognathi株JT-Shiz-119からの新規ベータガラクトシドアルファ2,6-シアリルトランスフェラーゼをクローン化、発現、特徴づけました。タンパク質は、グリコシルトランスフェラーゼファミリー80に分類された海洋細菌アルファ2,6-シアリルトランスフェラーゼと56-96％の同一性を示しました。切断された組換え酵素は、3カラムのクロマトグラフィステップを介して、ドデシル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル電気泳動による単一帯域として精製されました。酵素は、既知の海洋細菌アルファ2,6-シアリルトランスフェラーゼと比較して異なる活性を持っていました。ただし、Alpha2,6-Sialyltransferaseは、JT0160、P。leiognathi株Jt-Shiz-145、およびPhotobacterium sp。JT-ISH-224株は、P。leiognathi株JT-Shiz-119からクローン化された組換え酵素の両方をアルファ2,6-シアリルトランスフェラーゼとアルファ2,6-リンカー特有の神経アミニジーゼ活性の両方を示したアルファ2,6-シアリルトランスフェラーゼ活性のみを示します。私たちの結果は、Cazyデータベースのグループ80グリコシルトランスフェラーゼファミリーに属する細菌シアリルトランスフェラーゼの包括的な理解に向けた重要な情報を提供します。

We cloned, expressed, and characterized a novel beta-galactoside alpha2,6-sialyltransferase from Photobacterium leiognathi strain JT-SHIZ-119. The protein showed 56-96% identity to the marine bacterial alpha2,6-sialyltransferases classified into glycosyltransferase family 80. The sialyltransferase activity of the N-terminal truncated form of the recombinant enzyme was 1477 U/L of Escherichia coli culture. The truncated recombinant enzyme was purified as a single band by sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis through 3 column chromatography steps. The enzyme had distinct activity compared with known marine bacterial alpha2,6-sialyltransferases. Although alpha2,6-sialyltransferases cloned from marine bacteria, such as Photobacterium damselae strain JT0160, P. leiognathi strain JT-SHIZ-145, and Photobacterium sp. strain JT-ISH-224, show only alpha2,6-sialyltransferase activity, the recombinant enzyme cloned from P. leiognathi strain JT-SHIZ-119 showed both alpha2,6-sialyltransferase and alpha2,6-linkage-specific neuraminidase activity. Our results provide important information toward a comprehensive understanding of the bacterial sialyltransferases belonging to the group 80 glycosyltransferase family in the CAZy database.