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Circulation. Cardiovascular imaging2008Sep01Vol.1issue(2)

導入遺伝子レポーター遺伝子発現のために修飾された経皮筋内膜内注射の自己目膜間葉系幹細胞のin vivo陽性陽子放射断層撮影断層

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

背景:ブタ骨髄由来間葉系幹細胞(MSC)に、トリフュージョンタンパク質ルシフェラーゼ、赤蛍光タンパク質およびヘルペスシンプレックストランケーティングチミジンキナーゼ(LV-RLLLFP-TTK;ポジトロンエミッションエミッションのヘルペスシンプレックストランケーティングタンパク質の導入遺伝子発現のために、レンチウイルスベクターを安定してトランスフェクトしました。筋膜内で提供されたMSC運命のin vivo非侵襲的追跡のための断層撮影[PET]レポーター遺伝子)。 方法と結果:農場の豚に閉じた胸部の再灌流筋膜梗塞が作成されました。心筋梗塞の16日後、LV-RL-RFP-TTK-MSCは、梗塞境界ゾーンでの電気機械マッピングガイダンスを使用して筋膜内に注入されました(n = 7)。LV-RL-RFP-TTK-MSC治療後30 +/- 2時間と7日後の10 MCI [18F] -FHBGおよび13N-アンモニアPETの静脈内注射の後、ペット計算術の代謝および灌流イメージングを実施しました。MRIを使用した[18F] -FHBG PET-Computed Tomographyの融合イメージングを使用して、注入されたLV-RL-RFP-TTK-MSCの心筋位置を決定しました。注射の7日後、[18F] -FHBG PETは、ルシフェラーゼ活性の測定によって確認された、治療動物の心膜および胸膜の吸収が軽度に増加し、心臓の摂取量が減少したことを示しました。10日間で、LV-RLFP-TTK-MSC処理動物のMRIによる梗塞サイズはコントロールよりも小さかった(n = 7)(23.3 +/- 1.5%対30.2 +/- 3.5%、P <0.005)。心内膜内送達から10日後の心筋における心筋におけるLV-RLFP-TTK-MSC(注入細胞の5.8 +/- 1.1%)の存在が組織学的に確認されました。 結論:レポーター遺伝子イメージングにより、臨床PETスキャナーを使用して出産後10日で、ペリの繁殖ブタ心筋における実行可能なLV-RLLFP-TTK-MSCの持続性を追跡することができます。

背景:ブタ骨髄由来間葉系幹細胞(MSC)に、トリフュージョンタンパク質ルシフェラーゼ、赤蛍光タンパク質およびヘルペスシンプレックストランケーティングチミジンキナーゼ(LV-RLLLFP-TTK;ポジトロンエミッションエミッションのヘルペスシンプレックストランケーティングタンパク質の導入遺伝子発現のために、レンチウイルスベクターを安定してトランスフェクトしました。筋膜内で提供されたMSC運命のin vivo非侵襲的追跡のための断層撮影[PET]レポーター遺伝子)。 方法と結果:農場の豚に閉じた胸部の再灌流筋膜梗塞が作成されました。心筋梗塞の16日後、LV-RL-RFP-TTK-MSCは、梗塞境界ゾーンでの電気機械マッピングガイダンスを使用して筋膜内に注入されました(n = 7)。LV-RL-RFP-TTK-MSC治療後30 +/- 2時間と7日後の10 MCI [18F] -FHBGおよび13N-アンモニアPETの静脈内注射の後、ペット計算術の代謝および灌流イメージングを実施しました。MRIを使用した[18F] -FHBG PET-Computed Tomographyの融合イメージングを使用して、注入されたLV-RL-RFP-TTK-MSCの心筋位置を決定しました。注射の7日後、[18F] -FHBG PETは、ルシフェラーゼ活性の測定によって確認された、治療動物の心膜および胸膜の吸収が軽度に増加し、心臓の摂取量が減少したことを示しました。10日間で、LV-RLFP-TTK-MSC処理動物のMRIによる梗塞サイズはコントロールよりも小さかった(n = 7)(23.3 +/- 1.5%対30.2 +/- 3.5%、P <0.005)。心内膜内送達から10日後の心筋における心筋におけるLV-RLFP-TTK-MSC(注入細胞の5.8 +/- 1.1%)の存在が組織学的に確認されました。 結論:レポーター遺伝子イメージングにより、臨床PETスキャナーを使用して出産後10日で、ペリの繁殖ブタ心筋における実行可能なLV-RLLFP-TTK-MSCの持続性を追跡することができます。

BACKGROUND: Porcine bone marrow-derived mesenchymal stem cells (MSCs) were stably transfected with a lentiviral vector for transgene expression of the trifusion protein renilla luciferase, red fluorescent protein and herpes simplex truncated thymidine kinase (LV-RL-RFP-tTK; positron emission tomography [PET] reporter gene) for in vivo noninvasive tracking of the intramyocardially delivered MSC fate. METHODS AND RESULTS: A closed-chest, reperfused myocardial infarction was created in farm pigs. Sixteen days after myocardial infarction, LV-RL-RFP-tTK-MSCs were injected intramyocardially using electromechanical mapping guidance in the infarct border zone (n=7). PET-computed tomographic metabolic and perfusion imaging was performed after an intravenous injection of 10 mCi [18F]-FHBG and 13N-ammonia PET at 30+/-2 hours and 7 days after LV-RL-RFP-tTK-MSC treatment. Fusion imaging of the [18F]-FHBG PET-computed tomography with MRI was used to determine the myocardial location of the injected LV-RL-RFP-tTK-MSCs. Seven days after injections, [18F]-FHBG PET showed a decreased cardiac uptake with a mild increased pericardial and pleura uptake in the treated animals, which was confirmed by the measurement of luciferase activity. At 10 days, infarct size by MRI in the LV-RL-RFP-tTK-MSC-treated animals was smaller than controls (n=7) (23.3+/-1.5% versus 30.2+/-3.5%, P<0.005). The presence of the LV-RL-RFP-tTK-MSCs (5.8+/-1.1% of the injected cells) in the myocardium 10 days after intramyocardial delivery was confirmed histologically. CONCLUSIONS: Reporter gene imaging enables the tracking of the persistence of viable LV-RL-RFP-tTK-MSC in the peri-infarcted porcine myocardium at 10 days after delivery using clinical PET scanners.

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