腫瘍送達とジスルフィド結合およびチオエーテル結合抗体 - マイタンズノイドコンジュゲートのin vivo処理

抗体薬物コンジュゲート（ADC）は、細胞表面に標的抗原を発現する癌細胞を根絶するように設計されています。ADCの重要なコンポーネントは、細胞毒性剤を共有結合するリンカーです。カナグ抗原を標的とするものなどのジスルフィドベースのリンカーで調製されたいくつかの抗体マイタンノイドコンジュゲートは、未溶解性のチオエーテルベースのリンカーで調製された対応するコンジュゲートよりも、前臨床マウス異種移植モデルでより多くの活性を示すことが示されています。リンカーが抗体 - マイタンズノイドコンジュゲートの送達と活性化にどのように影響するかを調査するために、300マイクログ/kgの単一の静脈内投与後のCANAG陽性腫瘍組織からの[（3）h]メイタンシノイドを分離および特徴づけました（メイタンシノイドドースに基づく）抗カナグ抗体（HUC242） - （3）cleave式ジスルフィドリンカーと緩やかなチオエーテルリンカーで調製されたH-マイタンズノイドコンジュゲート。ジスルフィド結合HUC242-SPDB-DM4の3つの標的依存性腫瘍代謝物、すなわち、Lysine-N（Epsilon）-Spdb-DM4、DM4、およびS-Methyl-DM4を特定しました。S-Methyl-DM1が検出されなかったことを除いて、妨害されていないジスルフィド結合HUC242-SPP-DM1コンジュゲートのための同様の代謝物が見つかりました。削除できないチオエーテルリンクHUC242-SMCC-DM1の唯一の代謝物は、lysine-n（epsilon）-smcc-dm1でした。7日間にわたる腫瘍でのHUC242-SMCC-DM1の代謝物のAUCは、ジスルフィド結合コンジュゲートの代謝産物の対応するAUCよりも約2倍大きかった。ジスルフィド結合コンジュゲートの親油性代謝産物は、細胞外添加時の細胞ベースの生存率アッセイにおいて、より親水性のリジン-N（エプシロン） - リンカーマイタンシノイドよりもほぼ1000倍の細胞毒性があることがわかりました。ジスルフィド結合コンジュゲート（DM4およびS-メチル-DM4、およびDM1）の親油性代謝物に関連する細胞殺害特性は、ジスルフィドベースの抗体マイタンシノイドコンジュゲートでしばしば観察されるin vivoでの優れたin vivo効果の説明を提供します。異種移植マウスモデルのリンカー。

Antibody-drug conjugates (ADCs) are designed to eradicate cancer cells that express the target antigen on their cell surface. A key component of an ADC is the linker that covalently connects the cytotoxic agent to the antibody. Several antibody-maytansinoid conjugates prepared with disulfide-based linkers such as those targeting the CanAg antigen have been shown to display more activity in preclinical mouse xenograft models than corresponding conjugates prepared with uncleavable thioether-based linkers. To investigate how the linker influences delivery and activation of antibody-maytansinoid conjugates, we isolated and characterized the [(3)H]maytansinoids from CanAg-positive tumor tissues following a single intravenous administration of 300 microg/kg (based on maytansinoid dose) of anti-CanAg antibody (huC242)-(3)H-maytansinoid conjugates prepared with cleavable disulfide linkers and an uncleavable thioether linker. We identified three target-dependent tumor metabolites of the disulfide-linked huC242-SPDB-DM4, namely, lysine-N(epsilon)-SPDB-DM4, DM4, and S-methyl-DM4. We found similar metabolites for the less hindered disulfide-linked huC242-SPP-DM1 conjugate with the exception that no S-methyl-DM1 was detected. The sole metabolite of the uncleavable thioether-linked huC242-SMCC-DM1 was lysine-N(epsilon)-SMCC-DM1. The AUC for the metabolites of huC242-SMCC-DM1 at the tumor over 7 d was about 2-fold greater than the corresponding AUC for the metabolites of the disulfide-linked conjugates. The lipophilic metabolites of the disulfide-linked conjugates were found to be nearly 1000 times more cytotoxic than the more hydrophilic lysine-N(epsilon)-linker-maytansinoids in cell-based viability assays when added extracellularly. The cell killing properties associated with the lipophilic metabolites of the disulfide-linked conjugates (DM4 and S-methyl-DM4, and DM1) provide an explanation for the superior in vivo efficacy that is often observed with antibody-maytansinoid conjugates prepared with disulfide-based linkers in xenograft mouse models.