5-フルオロウラシル（5-FU）ベースの術後化学療法の恩恵を受けたコドン72プロリン対立遺伝子でTP53変異を持つ腫瘍を持つ結腸直腸癌患者の同定

背景：術後化学療法は、デュークスのステージCまたは初期段階の結腸直腸癌（CRC）患者の標準的なモダリティとして広く受け入れられていますが、治療の恩恵を受ける可能性のある人を予測するバイオマーカーは特定されていません。以前のin vitroおよび臨床調査では、野生型P53遺伝子（TP53）腫瘍のCRC患者が5-フルオロウラシル（5-FU）ベースの化学療法の恩恵を受けることが報告されていますが、変異したTP53腫瘍を有する患者はそうではありません。しかし、これらの研究は、一本鎖立体構造多型の有無にかかわらず免疫組織化学によるTP53の突然変異ステータスを評価し、突然変異頻度は研究ごとに異なっていました。さらに、p53コドン72の多型状態は、アルギニンまたはプロリン残基（R72p）をもたらし、タンパク質の機能に大きく影響すると考えられていますが、調べられませんでした。 方法：CRC患者、特に術後化学療法を受けた患者の予後を予測する分子マーカーとしてのTP53変異の有意性を評価するために、新鮮なCRC腫瘍からの直接配列決定により変異を調べ、変異したTP53のR72P多症を評価しました。組み合わせた変異体対立遺伝子および多型対立遺伝子特異的ポリメラーゼ連鎖反応（PCR）。 結果：TP53変異は、211の日本のCRC腫瘍のうち147（70％）で発生しました。変異は、R72対立遺伝子の93（63％）腫瘍とP72対立遺伝子の54（37％）腫瘍で観察されました。TP53の変化はCRC患者全体に予後的に有意ではありませんが、術後化学療法を受けず、変異したTP53-R72を運んだデュークスのCRC患者は、変異したTP53-P72の場合よりも有意に長い生存時間を示したことがわかりました。全生存率（p = 0.012）によって評価されます。 結論：変異体対立遺伝子と多型対立遺伝子特異的PCRを組み合わせて、日本のCRC患者におけるTP53変異対立遺伝子のコドン72多型状態を定義しました。TP53変異、特にP72対立遺伝子を持つ腫瘍を持つデュークスの第C段階の大腸がん患者が、5-FUベースの術後化学療法の恩恵を受けた可能性を高めました。

BACKGROUND: Although postoperative chemotherapy is widely accepted as the standard modality for Dukes' stage C or earlier stage colorectal cancer (CRC) patients, biomarkers to predict those who may benefit from the therapy have not been identified. Previous in vitro and clinical investigations reported that CRC patients with wild-type p53 gene (TP53)-tumors benefit from 5-fluorouracil (5-FU) based chemotherapy, while those with mutated TP53-tumors do not. However, these studies evaluated the mutation-status of TP53 by immunohistochemistry with or without single-strand conformation polymorphism, and the mutation frequency was different from study to study. In addition, the polymorphic status at p53 codon 72, which results in arginine or proline residues (R72P) and is thought to influence the function of the protein significantly, was not examined. METHODS: To evaluate the significance of the TP53 mutation as a molecular marker to predict the prognosis of CRC patients, especially those who received postoperative chemotherapy, we examined the mutation by direct sequencing from fresh CRC tumors and evaluated the R72P polymorphism of the mutated TP53 by a combined mutant allele- and polymorphic allele-specific polymerase chain reaction (PCR). RESULTS: The TP53 mutation occurred in 147 (70%) of 211 Japanese CRC tumors. The mutation was observed in 93 (63%) tumors on the R72 allele and in 54 (37%) tumors on the P72 allele. Although the alterations to TP53 have no prognostic significance for CRC patients overall, we found that Dukes' stage C CRC patients who did not receive postoperative chemotherapy and carried the mutated TP53-R72 showed significantly longer survival times than those with the mutated TP53-P72 when evaluated by overall survival (p = 0.012). CONCLUSION: Using a combined mutant allele- and polymorphic allele-specific PCR, we defined the codon 72 polymorphic status of the TP53 mutated allele in Japanese CRC patients. We raised a possibility that Dukes' stage C colorectal cancer patients with tumors carrying TP53 mutation, especially the P72 allele, benefited from 5-FU based postoperative chemotherapy.