強力なベンゾフラノールおよびリポキシゲナーゼ反応のN-ヒドロキシ尿素阻害剤によって刺激された5-リポキシゲナーゼのシュードペルオキシダーゼ活性

ブタ白血球からの精製された5-リポキシゲナーゼは、リポキシゲナーゼ反応の強力な阻害剤の存在下での脂質ヒドロペルオキシドの分解を触媒することがわかった。ジフェニル-N-ヒドロキシ尿素、4-ヒドロキシベンゾフランおよび5-ヒドロキシジドロベンゾフランの誘導体はすべて、5-リポキシゲナーゼ媒介破壊の13-ヒドロペルオキシオクタデカディエノ酸（13-HPOD）を刺激しました。反応は阻害剤およびヒドロペルオキシド濃度（1〜10ミクロム）に依存しており、ATPとCa2+が省略されたとき、または対応するアルコールに置き換えられたとき、熱不活性酵素を使用して検出できませんでした。このシュードペルオキシダーゼ反応中の阻害剤の安定性は、5-ヒドロキシ-2-フェネチル-6-（3-フェノキシプロピル）-2,3-ジヒドロベンゾフランおよびN-（4-クロロフェニル）-N-ヒドロキシ型の回収率を測定することにより、調査されました。n ' - （3-クロロフェニル）逆相を使用した反応混合物からの尿素H.P.L.C.等モル濃度の13-HPODおよび阻害剤（10 microM）を使用し、13-HPODの50％が消費された条件下で、ベンゾフラノールの濃度は30％減少しましたが、N-ヒドロキシ尿素誘導体は完全に回収される可能性があります。反応混合物。シュードペルオキシダーゼ反応の刺激は、ヒト白血球によるロイコトリエンB4生合成の非常に効果的な阻害剤[IC50（濃度50％阻害を引き起こす50％阻害）100 nm未満]でのみ検出できますが、より低い強度または他の阻害剤の密接に関連する構造類似体ではそうではありません。Nordihydroguaiaret酸、ケルセチン、ヒドロキサメートなどA-64077。これらの結果は、5-リポキシゲナーゼがシュードペルオキシダーゼ活性を持っていることを示しており、N-ヒドロキシ尿素とベンゾフラノール系列の両方の強力な阻害剤が酵素の還元剤として機能できることを示しています。

The purified 5-lipoxygenase from porcine leukocytes was found to catalyse the degradation of lipid hydroperoxides in the presence of potent inhibitors of the lipoxygenase reaction. Derivatives of diphenyl-N-hydroxyureas, 4-hydroxybenzofurans and 5-hydroxydihydrobenzofurans all stimulated the 5-lipoxygenase-mediated destruction of 13-hydroperoxyoctadecadienoic acid (13-HPOD). The reaction was dependent on inhibitor and hydroperoxide concentrations (1-10 microM) and could not be detected using heat-inactivated enzyme, when ATP and Ca2+ were omitted or when the hydroperoxide was replaced by the corresponding alcohol. The stability of the inhibitors during this pseudoperoxidase reaction was investigated by measuring the recoveries of 5-hydroxy-2-phenethyl-6-(3-phenoxypropyl)-2,3-dihydrobenzofuran and N-(4-chlorophenyl)-N-hydroxy-N'-(3-chlorophenyl)urea from the reaction mixtures using reverse-phase h.p.l.c. By using an equimolar concentration of 13-HPOD and inhibitor (10 microM) and under conditions where 50% of the 13-HPOD was consumed, the concentration of the benzofuranol decreased by 30%, whereas the N-hydroxyurea derivative could be completely recovered from the reaction mixture. A stimulation of the pseudoperoxidase reaction could be detected only with very effective inhibitors of leukotriene B4 biosynthesis by human leucocytes [IC50 (concn. causing 50% inhibition) less than 100 nM], but not with closely related structural analogues of lower potency or other inhibitors such as nordihydroguaiaretic acid, quercetin or the hydroxamate A-64077. These results demonstrate that 5-lipoxygenase possesses a pseudoperoxidase activity and indicate that potent inhibitors in both N-hydroxyurea and benzofuranol series can function as reducing agents for the enzyme.