スフィンゴシンキナーゼ阻害剤N、N-ジメチルスフィンゴシンは、新生児過形成を阻害します

背景と目的：スフィンゴシン-1-リン酸とその受容体は、血管損傷後の血管平滑筋細胞（VSMC）増殖に関与している可能性があります。ここでは、VSMCの増殖、アポトーシス、および新生児形成に対するスフィンゴシンキナーゼ（SK）阻害剤であるD-エリスロ-N、N-ジメチルスフィンゴシン（DMS）の効果を評価します。 実験的アプローチ：胎児の子牛血清（FCS）に対するin vitroでの成長応答は、ポアチンの静止一次培養における[（3）H] - チミジン調節および細胞外シグナル調節キナーゼ-1/2（ERK-1/2）活性化によって測定されました。SK阻害剤DMSのさまざまな濃度の存在下および非存在下でのVSMC。DMSによる生体内治療は、冠動脈のバルーン損傷に続いて、局所内腔内カテーテルで供給されました。動脈内膜形成は、血管造影、筋肉次、組織形態計測によって調査されました。 重要な結果：in vitro実験では、DMSがタンパク質キナーゼC（PKC）独立メカニズムを介した[（3）H] - チミジンの取り込みとERK-1/2活性化の用量依存性の減少を誘導したことが示されました。12 +/- 6および15 +/- 10 microM。DMSもAktシグナル伝達を減らしました。in vivo Defiry dmsの4週間後、すべての治療群で完全な機能的内皮再生が観察され、内膜形成の大幅な減少（車両23.7 +/- 4.6％対DMS注入8.92 +/- 2.9％、P <0.05）。 結論と意味：これらの結果は、SK阻害剤、DMS、新生内膜形成の減少の局所投与、およびこの効果がERK-1/2およびAKTシグナル伝達の阻害、および平滑筋の成長の変調を伴う可能性があることを示しています。

BACKGROUND AND PURPOSE: Sphingosine-1-phosphate and its receptors may be involved in vascular smooth muscle cell (VSMC) proliferation following vascular injury. Here, we evaluate the effect of d-erythro-N,N-dimethylsphingosine (DMS), a sphingosine kinase (SK) inhibitor, on VSMC proliferation, apoptosis and neointimal formation. EXPERIMENTAL APPROACH: Growth responses in vitro to fetal calf serum (FCS) were measured by [(3)H]-thymidine incorporation and extracellular signal-regulated kinase-1/2 (ERK-1/2) activation in quiescent primary cultures of porcine VSMC in the presence and absence of various concentrations of the SK inhibitor DMS. In vivo treatment with DMS was delivered with a local endoluminal catheter, following balloon injury of coronary arteries. The artery intimal formation was investigated by angiography, myography and histomorphometry. KEY RESULTS: In vitro experiments indicated that DMS induced a dose-dependent reduction in [(3)H]-thymidine incorporation and ERK-1/2 activation via a protein kinase C (PKC) independent mechanism with an IC(50) value of 12 +/- 6 and 15 +/- 10 microM respectively. DMS also reduced Akt signalling. Four weeks following in vivo delivery of DMS, complete functional endothelial regeneration was observed in all treatment groups, with significant reduction of intimal formation (vehicle 23.7 +/- 4.6% vs. DMS infusion 8.92 +/- 2.9%, P < 0.05). CONCLUSIONS AND IMPLICATIONS: Taken together, these results demonstrate that local administration of the SK inhibitor, DMS, reduced neointimal formation, and this effect could involve inhibition of ERK-1/2 and Akt signalling, and modulation of smooth muscle growth.