MMPとTIMPを検出するためのZymographyと逆Zymography

ザイモグラフィは、タンパク質分解基質を含むポリアクリルアミドゲルを介したタンパク質の電気泳動分離です。変性（ただし、非還元）電気泳動後、タンパク質はレネチングされ、タンパク質分解活性のための適切な緩衝液でインキュベートされます。染色されたゲルの溶解の透明なゾーンは、活性プロテイナーゼを示しています。逆Zymographyは、プロテイナーゼ阻害剤を検出する同様の手法です。タンパク質のレネチング後、ゲルはメタロプロテイナーゼとインキュベートされ、ゲルに組み込まれた基質を消化します。阻害剤は、染色時の透明な背景に対する阻害の暗いゾーンとして示されています。

Zymography is the electrophoretic separation of proteins through a polyacrylamide gel containing a proteolytic substrate. After denaturing (but nonreducing) electrophoresis, proteins are renatured and incubated in an appropriate buffer for proteolytic activity. Clear zones of lysis in the stained gel indicated active proteinases. Reverse zymography is a similar technique to detect proteinase inhibitors. After renaturing of proteins, the gel is incubated with metalloproteinases which digest the substrate incorporated into the gel. Inhibitors are shown as dark zones of inhibition against a clear background upon staining.