MDM2アンタゴニストNutlin-3によって明らかにされた老化細胞のp53経路における転写活性の低下

p53腫瘍抑制因子は、細胞の老化の誘導と維持に重要な役割を果たしますが、老化細胞のストレスに対するp53調節反応はあまり理解されていません。ここでは、小分子MDM2アンタゴニストであるNutlin-3aを使用して、老化ヒト線維芽細胞のP53とP53経路のプローブ機能を選択的に活性化します。WI-38。我々の実験により、9つのp53標的遺伝子と4つのp53調節マイクロRNAのナッツリン誘導転写活性の全体的な減少が明らかになり、p53タンパク質レベルだけでなく、転写を活性化する能力も老化中に変化することを示しています。Nutlinの添加は、初期の通過細胞のレベルに対する老化細胞のドキソルビシン誘発P53タンパク質および転写活性を回復しましたが、そのアポトーシス活性を部分的に回復し、老化中の上流および下流のP53シグナル伝達の両方の変化が、毒性ストレスの減衰反応に責任があることを示唆しています。。

The p53 tumor suppressor plays a key role in induction and maintenance of cellular senescence but p53-regulated response to stress in senescent cells is poorly understood. Here, we use the small-molecule MDM2 antagonist, nutlin-3a, to selectively activate p53 and probe functionality of the p53 pathway in senescent human fibroblasts, WI-38. Our experiments revealed overall reduction in nutlin-induced transcriptional activity of nine p53 target genes and four p53-regulated microRNAs, indicating that not only p53 protein levels but also its ability to activate transcription are altered during senescence. Addition of nutlin restored doxorubicin-induced p53 protein and transcriptional activity in senescent cells to the levels in early passage cells but only partially restored its apoptotic activity, suggesting that changes in both upstream and downstream p53 signaling during senescence are responsible for attenuated response to genotoxic stress.