ヒツジ血漿におけるイリノテカンとSN38の定量化のための単純な液体クロマトグラフィー方法：肺動脈化化学拡張後のin vivo薬物動態化薬溶出ビーズを使用した肺動脈化化学拡大への応用

ヒツジ血漿中のイリノテカン（CPT11）とSN38の同時定量化のために、迅速かつ単純な液体クロマトグラフィー蛍光検出（LC-FD）メソッドが開発され、検証されました。Camptothecin（CPT）が内部標準として使用されました。サンプル調製には、アセトニトリルによる単一のステップタンパク質沈殿を使用しました。分離は、5ミクロムC18カラム（250 mm x 4.5 mm、5ミクロム）を使用して達成されました。36mMジドロゲン脱水ナトリウムと4 mMのナトリウム1ヘプタンスルホン酸アセトニトリル（72:28）で構成される移動相（72:28）、移動相を3に調整しました。流量は1.45 ml/minで、蛍光検出は355/515 nm（励起/発光波長）で動作しました。実行時間は13分でした。この方法は、選択性、抽出回復、直線性、日中および日間精度と精度、定量化と安定性の制限に関して検証されました。この方法には、CPT11とSN38の両方で5 ng/mLの定量化の制限があります。アッセイは、CPT11およびSN38でそれぞれ5〜5000 ng/ml、240 ng/mlの範囲の濃度で線形でした。この方法は、羊モデルの肺動脈塞栓術（PACE）後のCPT11の血漿薬物動態研究を実施するために正常に使用されました。また、羊のリンパとヒト血漿のCPT11およびSN38分析についても検証されました。

A rapid and simple liquid chromatography-fluorescence detection (LC-FD) method was developed and validated for the simultaneous quantification of irinotecan (CPT11) and SN38 in sheep plasma. Camptothecin (CPT) was used as the internal standard. A single step protein precipitation with acetonitrile was used for sample preparation. The separation was achieved using a 5 microm C18 column (250 mm x 4.5 mm, 5 microm) with a mobile phase composed of 36 mM sodium dihydrogen phosphate dehydrate and 4 mM sodium 1 heptane sulfonate-acetonitrile (72:28), the pH of the mobile phase was adjusted to 3. The flow rate was 1.45 mL/min and the fluorescence detection was operated at 355/515 nm (excitation/emission wavelengths). The run time was 13 min. The method was validated with respect to selectivity, extraction recovery, linearity, intra- and inter-day precision and accuracy, limit of quantification and stability. The method has a limit of quantification of 5 ng/mL for both CPT11 and SN38. The assay was linear over concentrations ranging from 5 to 5000 ng/mL and to 240 ng/mL for CPT11 and SN38, respectively. This method was used successfully to perform plasma pharmacokinetic studies of CPT11 after pulmonary artery embolization (PACE) in a sheep model. It was also validated for CPT11 and SN38 analysis in sheep lymph and human plasma.