Camellia Sinensisの苗木におけるフラバン-3-オールの分布と生合成と生合成酵素をコードする遺伝子の発現

8週齢の茶（Camellia sinensis）実生の若い葉、茎、主および外側根、および子葉におけるフェノール化合物の分布を、HPLC-MSを使用して調査しました（2）。14個の化合物、フラバン-3-オール、クロロゲン酸、およびケンペフェロール-O-グリコシドは、保持時間、吸光度スペクトル、およびMS断片化パターンに基づいて同定されました。主要なフェノールは、主に苗の緑色に位置する（ - ） - エピガロカテキン-3-O-ガレートと（ - ） - エピカテキン-3-O-ガレートでした。[環（14）C]フェニルアラニンからのかなりの量の放射能を（ - ） - エピカテキン、（ - ） - エピガロカテキン、（ - ） - エピカテキン-3-O-ガレートおよび（ - ） - エピガロカテキン-3-Oに組み込まれました - 若い葉と茎の組織によって、摂取。フラバン-3-オール生合成に関与する酵素をコードする遺伝子の発現、CHS、CHI、F3H、F3'5'H、DFR、ANS、ANR、およびLARが調査されました。LARを除くすべての遺伝子の転写産物は、根や子葉よりも葉や茎の方が豊富でした。larの転写産物の量に有意差は見られませんでした。これらの発見は、茶の苗木では、フラバン-3-オールがナリンゲニン - カルコン - >ナリンゲニン - >ジヒドロカエンペフェロール経路によって生成されることを示しています。ジヒドロカエンペロールは、（ - ） - エピガロカテキン-3-O-ガレートおよび他のフラバン-3-オールの合成の分岐点であり、フラボノイド3'-ヒドロキシラーゼ媒介変換のジヒドロクルセチンまたはジヒドロクルセチンまたはまたはフラボノイド3 '、5'-ヒドロキシラーゼ触媒変換は、ジヒドロミキシテンへの変換を行い、その後の段階で、ジヒドロフラバノール4-ラデクゼ、アントシアニジンシンターゼ、アントシアニジンシンターゼ、フラバン-3-溶質シンセーゼによって触媒された連続反応を含む。

The distribution of phenolic compounds in young and developing leaves, stems, main and lateral roots and cotyledons of 8-week-old tea (Camellia sinensis) seedlings was investigated using HPLC-MS(2). Fourteen compounds, flavan-3-ols, chlorogenic acids, and kaempferol-O-glycosides, were identified on the basis of their retention time, absorbance spectrum, and MS fragmentation pattern. The major phenolics were (-)-epigallocatechin-3-O-gallate and (-)-epicatechin-3-O-gallate, located principally in the green parts of the seedlings. Considerable amounts of radioactivity from [ring-(14)C]phenylalanine were incorporated in (-)-epicatechin, (-)-epigallocatechin, (-)-epicatechin-3-O-gallate and (-)-epigallocatechin-3-O-gallate, by tissues of young and developing leaves and stems. Expression of genes encoding enzymes involved in flavan-3-ol biosynthesis, CHS, CHI, F3H, F3'5'H, DFR, ANS, ANR and LAR was investigated. Transcripts of all genes, except LAR, were more abundant in leaves and stems than in roots and cotyledons. No significant difference was found in the amount of transcript of LAR. These findings indicate that in tea seedlings flavan-3-ols are produced by a naringenin-chalcone-->naringenin-->dihydrokaempferol pathway. Dihydrokaempferol is a branch point in the synthesis of (-)-epigallocatechin-3-O-gallate and other flavan-3-ols which can be formed by routes beginning with either a flavonoid 3'-hydroxylase mediated conversion of the flavonol to dihydroquercetin or a flavonoid 3',5'-hydroxylase-catalysed conversion to dihydromyricetin with subsequent steps involving sequential reactions catalysed by dihydroflavanol 4-reductase, anthocyanidin synthase, anthocyanidin reductase and flavan-3-ol gallate synthase.