膵臓癌細胞株SW1990およびCFPAC-1の側面集団には、がん幹様細胞が濃縮されています

この研究では、最初に膵臓癌細胞株における側面集団（SP）細胞の存在を決定しようとしました。さらに、SPおよび非SP細胞の生物学的特性を比較しました。膵臓癌細胞株における副集団細胞の存在は、Hoechst 33342染色およびFACS分析によって検出されました。細胞周期分布は、フローサイトメトリーを使用して分析されました。SPおよび非SP細胞は、さまざまな濃度のゲムシタビンにさらされました。Annexin-VおよびPI染色を使用して、MTTアッセイとフローサイトメトリーを使用して薬物感受性を調べました。in vivoでの腫瘍形成能力を比較するために、ヌードマウスのグループには、さまざまな数のSPおよび非SP細胞が矯正的に接種されました。SPおよび非SP細胞におけるCD44+ CD24+およびCD133+の割合も、FACS分析によって検出されました。SP画分は、BXPC-3、CFPAC-1、MIA PACA-2、PANC-1、およびSW1990膵臓癌細胞株で検出されました。細胞周期分析により、SP細胞は、非SP細胞と比較した場合、G1相にはより多くの細胞が含まれ、S相の細胞が少ないことが明らかになりました。SP細胞は、in vivo移植後のBALB/Cヌードマウスへの腫瘍形成能力の増加と、ゲムシタビンへのin vitro曝露後の化学療法耐性の増加を示しました。FACS分析により、SP細胞には非SP細胞よりも多くのCD44+ CD24+およびCD133+細胞が含まれていることが示されました。結論として、これらの観察結果は、膵臓癌細胞株のSP細胞が癌幹細胞の特性を持っていることを示唆しています。したがって、SP細胞は、膵臓癌の効果的な治療のための新しい特異的標的である可能性があります。

In this study, we first sought to determine the existence of side population (SP) cells in pancreatic cancer cell lines. Furthermore, we compared the biological characteristics of SP and non-SP cells. The presence of side population cells in pancreatic cancer cell lines was detected by Hoechst 33342 staining and FACS analysis. Cell cycle distribution was analyzed using flow cytometry. SP and non-SP cells were exposed to various concentrations of gemcitabine; drug sensitivity was examined using the MTT assay and flow cytometry using Annexin-V and PI staining. To compare the tumorigenic ability in vivo, groups of nude mice were orthotopically inoculated with varying numbers of SP and non-SP cells. The percentages of CD44+CD24+ and CD133+ in SP and non-SP cells were also detected by FACS analysis. The SP fraction was detected in BxPc-3, CFPAC-1, MIA PaCa-2, PANC-1 and SW1990 pancreatic cancer cell lines. Cell cycle analysis revealed that the SP cells contained more cells in the G1 phase and fewer cells in the S phase when compared with the non-SP cells. The SP cells exhibited increased tumorigenetic ability following in vivo transplantation into BALB/C nude mice and increased chemoresistance following in vitro exposure to gemcitabine. FACS analysis showed that the SP cells contained more CD44+CD24+ and CD133+ cells than the non-SP cells. In conclusion, these observations suggest that SP cells in the pancreatic cancer cell lines possess the property of cancer stem cells. SP cells may therefore be novel specific targets for the effective treatment of pancreatic cancer.