循環血小板由来の微粒子の大部分は、アネキシンVを結合できず、リン脂質依存性凝固剤活性を欠いており、糖タンパク質IBのより大きな発現を示します。

微粒子がホスファチジルセリンを曝露することは広く受け入れられており、それがアネキシンVに結合します。この研究の目的は、抗原性特性と、血小板由来の微粒子のアネキシンV陽性および陰性のサブポーポレーションのリン脂質依存性凝固剤活性を比較することです。アネキシンV陽性および陰性の微粒子を同定し、フローサイトメトリーを使用して特徴づけられ、凝固剤活性はリン脂質依存性アッセイ（XACT）によって測定されました。刺激されていない血小板型血漿では、血小板由来の微粒子の80％がアネキシンVを結合できませんでした。アッセイ成分（緩衝液、カルシウム、アネキシンV濃度）を変化させても、アネキシンVの結合は変化しませんでした。アネキシンVを結合した微粒子の割合はアゴニストに依存しており、コラーゲンなどの生理学的アゴニストは、イオノフォアなどの非生理学的アゴニストよりもアネキシンV結合微粒子が少なくなります。CD42B（糖タンパク質IB）の発現は有意に減少し、Annexin Vの陰性亜集団と比較して、Annexin V陽性でCD62PおよびCD63発現が有意に増加しました。Annexin V陽性と陰性の亜集団の間にCD41、CD61、CD42A、CD40Lの発現に有意差はありませんでした。アネキシンV結合とXACTの間に有意な相関が見つかりました（p = 0.033）。アネキシンVはリン脂質活性の95％以上を阻害し、アネキシンV結合が凝固剤活性の真の反映であることを示唆しています。刺激されていない血漿中の血小板由来の微粒子の大部分は、アネキシンVを結合することができず、アネキシンV陽性イベントと比較してCD42Bのレベルが大幅に増加しました。リン脂質依存性凝固剤活性は、アネキシンV陽性亜集団に限定されており、アゴニスト依存性です。アネキシンV陰性微粒子の重要性は不明ですが、凝固剤リン脂質活性を除いて他の活性を持っている可能性があります。

It has been widely accepted that microparticles expose phosphatidylserine which in turn binds annexin V. It was the objective of this study to compare the antigenic characteristics and phospholipid-dependent procoagulant activity of annexin V positive and -negative subpopulations of platelet-derived microparticles. Annexin V positive and -negative microparticles were identified and characterised using flow cytometry and procoagulant activity was measured by a phospholipid-dependent assay (XACT). In unstimulated platelet-poor plasma, 80% of platelet-derived microparticles failed to bind annexin V. Varying the assay constituents (buffer, calcium and annexin V concentration) did not alter annexin V binding. The proportion of microparticles that bound annexin V was dependent upon the agonist, with physiological agonists such as collagen resulting in fewer annexin V binding microparticles than non-physiological agonists such as ionophore. CD42b (glycoprotein Ib) expression was significantly decreased and CD62p and CD63 expression were significantly increased in annexin V positive compared to annexin V negative subpopulations. There was no significant difference in CD41, CD61, CD42a and CD40L expression between annexin V positive and -negative subpopulations. A significant correlation between annexin V binding and XACT was found (p=0.033). Annexin V inhibited greater than 95% of phospholipid activity, suggesting that annexin V binding was a true reflection of procoagulant activity. The majority of platelet-derived microparticles in unstimulated plasma failed to bind annexin V and showed significantly increased levels of CD42b compared to annexin V positive events. Phospholipid-dependent procoagulant activity is limited to the annexin V positive subpopulation and is agonist-dependent. The significance of annexin V negative microparticles is unclear, however, it is possible that they possess other activities aside from procoagulant phospholipid activity.