マウス肝腫細胞株での銅輸送ATPaseの安定性と動員におけるコムドメイン含有1の役割1

commd1 {comm [銅代謝MURR1（マウスU2AF1-RS1領域1）] - 犬の銅毒性に関連するタンパク質であるドメイン含有1}の新しい機能が、分子および細胞生物学的技術を構成する多学的技術を構成する多学的技術で構成されるマルチ分類技術を備えたマウス肝腫細胞株HEPA 1-6で調べられました。CommD1の機能を明確にするために、CommD1-Knockdownは細胞にsiRNA（小さな干渉RNA）を導入することで達成されました。CommD1-Knockdownは銅の取り込みに影響を与えませんでしたが、銅の排泄を阻害し、Mt（Metallothionein）に縛られた形で主に存在していた銅の蓄積をもたらしました。肝臓の銅輸送体ATP7B（ATP依存性銅輸送体7beta）は、基底銅条件下でゴルジ膜トランスゴルジのネットワーク膜を局在化し、細胞質小胞に移行して濃度が排泄されると排泄される場合、細胞内に溶解すると、細胞が溶けます。CommD1-Knockdownは、ATP7Bの発現を減らし、Cu（I）キレーターで処理することにより銅濃度が減少した場合、ATP7Bの周辺からトランスゴルジネットワーク膜への再配置を廃止しました。CommD1-Knockdown中に、別のATP7B基質であるCis-DiaminediNedicloloplatinumとその隔離剤であるグルタチオンエチルエステルが適用されたときに、同じ現象が観察されました。これらの結果は、CommD1がATP7Bの量を維持し、細胞質小胞からトランスゴルジネットワーク膜へのATP7Bの動員を促進することを示唆しています。

A novel function of COMMD1 {COMM [copper metabolism MURR1 (mouse U2af1-rs1 region 1)]-domain-containing 1}, a protein relevant to canine copper toxicosis, was examined in the mouse hepatoma cell line Hepa 1-6 with multi-disciplinary techniques consisting of molecular and cellular biological techniques, speciation and elemental imaging. To clarify the function of COMMD1, COMMD1-knockdown was accomplished by introducing siRNA (small interfering RNA) into the cells. Although COMMD1-knockdown did not affect copper incorporation, it inhibited copper excretion, resulting in copper accumulation, which predominantly existed in the form bound to MT (metallothionein). It is known that the liver copper transporter Atp7b (ATP-dependent copper transporter 7beta), localizes on the trans-Golgi network membrane under basal copper conditions and translocates to cytoplasmic vesicles to excrete copper when its concentration exceeds a certain threshold, with the vesicles dispersing in the periphery of the cell. COMMD1-knockdown reduced the expression of Atp7b, and abolished the relocation of Atp7b back from the periphery to the trans-Golgi network membrane when the copper concentration was reduced by treatment with a Cu(I) chelator. The same phenomena were observed during COMMD1-knockdown when another Atp7b substrate, cis-diamminedichloroplatinum, and its sequestrator, glutathione ethylester, were applied. These results suggest that COMMD1 maintains the amount of Atp7b and facilitates recruitment of Atp7b from cytoplasmic vesicles to the trans-Golgi network membrane, i.e. COMMD1 is required to shuttle Atp7b when the intracellular copper level returns below the threshold.