新規蛍光基質を使用したラット脳核におけるエンドペプチダーゼ-2415の分布：エンドペプチダーゼ-2411との比較

中性メタロエンドペプチダーゼ-24.15（E.C。3.4.24.15; EP-24.15）の新しい蛍光基質が合成され、酵素の連続アッセイが可能になりました。基質であるグルタリル-phe-ala-ala-ala-phe-4-メトキシナフチルアミド（g-faaf-4mn）は、ep-24.15（km = 0.026 mm）によってphe-ala結合で切断されます。その後、AAF-4MNは、その成分アミノ酸とアミノペプチダーゼMによって強力なフルオロフォア4MNに加水分解されます。この方法により、ラット脳の微小放射性核内の特定の活性EP-24.15の測定が可能になりました。酵素は脳核内で比較的広い分布を持っていることがわかっており、活性は調査したすべての領域で15-80 nmol 4mn/mg Prot/hの範囲でした。EP-24.15の活性は、潜在的な基質にはダイノルフィン様ペプチドとLHRHが含まれる内側および外側前視線核で比較的高かった。EP-24.15の活性は、別のペプチド切断メタロエンザイムであるエンドペプチダーゼ-24.11（E.C. 3.4.24.11、「Enkephalinase」、EP-24.11）の活性と比較されました。EP-24.11は、大脳基底核および視界上核および超キシアマ核で非常に高い特異的活性を持つはるかに狭い分布を持っているように見えました。

A novel fluorogenic substrate for the neutral metalloendopeptidase-24.15 (E.C.3.4.24.15; EP-24.15) was synthesized which allowed continuous assay of the enzyme. The substrate, Glutaryl-Phe-Ala-Ala-Phe-4-methoxynaphthylamide (G-FAAF-4MN) is cleaved at the Phe-Ala bond by EP-24.15 (Km = 0.026 mM). The product, AAF-4MN is subsequently hydrolyzed to its constituent amino acids and the potent fluorophore 4MN by aminopeptidase M. This method has allowed the measurement of the specific activity EP-24.15 within microdissected nuclei of rat brain. The enzyme was found to have a relatively broad distribution within brain nuclei, and the activity ranged from 15-80 nmol 4MN/mg prot/h in all areas examined. The activity of EP-24.15 was relatively high in the medial and lateral pre-optic nuclei, where potential substrates include the dynorphin-like peptides and LHRH. The activity of EP-24.15 was compared with that of endopeptidase-24.11 (E.C.3.4.24.11, 'enkephalinase', EP-24.11), another peptide-cleaving metalloenzyme. EP-24.11 appeared to have a much more narrow distribution, with very high specific activity in basal ganglia as well as in the supraoptic and suprachiasmatic nuclei.