H9C2心筋細胞における上方制御タンパク質1遺伝子発現の心筋虚血前処理の酸化ストレスを介したアップレギュレーションは、環状AMP応答元素結合タンパク質によって調節されます

環状アンプ（cAMP）/プロテインキナーゼA（PKA）カスケードは、心筋細胞の増殖とアポトーシスにおいて中心的な役割を果たします。ここでは、H（2）O（2）が、cAMP応答元素結合タンパク質（CREB）を含む経路を介したH9C2心筋細胞の上方制御タンパク質1（MIPU1）遺伝子を抗アポトーシス心筋虚血性前処理の発現を刺激することを示します。H（2）O（2）によるH9C2心筋細胞の刺激により、MIPU1プロモーター活性が増加しました。ラットMIPU1プロモーターの分析により、2つの潜在的なcAMP反応要素が明らかになりましたが、そのうちの1つは、変異誘発と削除分析を使用して機能的であることが示されました。その後の研究により、H（2）O（2）は、PKA活性化を含む経路を介してCREBセリン133のリン酸化を増加させることが確立されました。ホスホ - クレブは、MIPU1プロモーターのCre-IIに結合することが実証され、H（2）O（2）治療により、CHIPによって評価されるように相互作用が増加しました。さらに、H（2）O（2）媒介MIPU1タンパク質発現のアップレギュレーションは、CREBの小さな干渉RNAによるCREB発現の抑制によって廃止されました。H9C2心筋細胞におけるH（2）O（2）誘発MIPU1のアップレギュレーションがcAMP/PKA依存性CREB活性化によって媒介されることが実証されました。

The cyclic AMP (cAMP)/protein kinase A (PKA) cascade plays a central role in cardiomyocyte proliferation and apoptosis. Here, we show that H(2)O(2) stimulates expression of the antiapoptotic myocardial ischemic preconditioning up-regulated protein 1 (Mipu1) gene in H9c2 cardiomyocytes through a pathway involving the cAMP-response element binding protein (CREB). Stimulation of H9c2 cardiomyocytes with H(2)O(2) resulted in increased Mipu1 promoter activity. Analysis of the rat Mipu1 promoter revealed two potential cAMP-response elements, one of which (CRE-II, TGTGGATGTTGACGAGCTTGT) was shown, using mutagenesis and deletion analysis, to be functional. Subsequent studies established that H(2)O(2) increased phosphorylation of CREB serine 133 through a pathway involving PKA activation. Phospho-CREB was demonstrated to bind to CRE-II of the Mipu1 promoter, and H(2)O(2) treatment resulted in increases in their interaction as assessed by ChIP. Furthermore, H(2)O(2)-mediated up-regulation of Mipu1 protein expression was abrogated by the suppression of CREB expression with small interfering RNA of CREB. It was demonstrated that the H(2)O(2)-induced up-regulation of Mipu1 in H9c2 cardiomyocytes was mediated by cAMP/PKA-dependent CREB activation.