新規選択的α7ニューロンニコチン性アセチルコリン受容体アゴニストABT-107のin vitro薬理学的特性評価

アルファ7ニコチン性アセチルコリン受容体（NACHR）活性の強化は、アルツハイマー病および統合失調症に存在する認知障害を改善するための治療アプローチと考えられています。この研究では、新規選択的α7NACHRアゴニストの5-（6- [（3R）-1-アザビシクロ[2,2,2] Oct-3- Yloxy]ピリダジン-3-イル）のin vitroプロファイルについて説明します。-1H-インドール（ABT-107）。ABT-107は、alpha7 NACHRS [ラットまたはヒト皮質、[（3）H]（1S、4S）-2,2-ジメチル-5-（6-フェニルピリダジン-3-イル）-5-aza-に高い親和性結合を示しました。2-Azoniabicyclo [2.2.1] Heptane（A-585539）、K（I）= 0.2-0.6 nmまたは[（3）h]メチルリカコニチン（MLA）、7 nm]は、少なくとも100倍選択的ではなかった非非非非usAlpha7 NACHRSおよびその他の受容体。機能的には、ABT-107は、ヒトまたは非ヒトα3BETA4、キメリック（alpha6/alpha3）Beta4、または5-HT（3a）受容体、およびヒトのニューロブラストマIMRIMRIMRIMRIMRの反応（2+）応答を発現するアフリカアキセノパス卵母細胞の検出可能な電流を誘発しませんでした。-32細胞（Alpha3*機能）およびヒトα4BETA2およびアルファ4BETA4NACHRは、ヒト胚性腎臓293細胞で発現しています。ABT-107は、卵母細胞（EC（50）、50-90 nmの総電荷、アセチルコリンに対して約80％正規化）でのヒトおよびラットのアルファ7NACHR電流応答を強力に誘発しました。（4-クロロ - フェニル）-2-メチル-3-プロピオニル - ピロール-1-イル] - ベンゼンスルホンアミド（A-867744）。ラット海馬では、ABT-107だけがalpha7拮抗薬MLAによって阻害されたalpha7様電流を誘発しました。歯状回の顆粒細胞では、A-867744と共同適用した場合、ABT-107は自発的阻害後のシナプス後電流活性を促進しました。alpha7 PAM [A-867744またはN- [（3R）-1-アザビシクロ[2.2.2] OCT-3-ILL] -4-クロロベンズアミド塩酸塩（PNU-20596）の存在下で、ABT-の追加107は、IMR-32細胞およびラット皮質培養におけるMLA感受性Alpha7 NACHR媒介Ca（2+）シグナルを誘発し、分化したPC-12細胞で細胞外シグナル調節キナーゼリン酸化を強化しました。ABT-107は、グルタミン酸誘発性毒性からラット皮質培養を保護するのにも効果的でした。要約すると、ABT-107は、薬理学的研究におけるこのサブタイプの役割を特徴付けるのに適した選択的高親和性alpha7 Nachrアゴニストです。

Enhancement of alpha7 nicotinic acetylcholine receptor (nAChR) activity is considered a therapeutic approach for ameliorating cognitive deficits present in Alzheimer's disease and schizophrenia. In this study, we describe the in vitro profile of a novel selective alpha7 nAChR agonist, 5-(6-[(3R)-1-azabicyclo[2,2,2]oct-3-yloxy]pyridazin-3-yl)-1H-indole (ABT-107). ABT-107 displayed high affinity binding to alpha7 nAChRs [rat or human cortex, [(3)H](1S,4S)-2,2-dimethyl-5-(6-phenylpyridazin-3-yl)-5-aza-2-azoniabicyclo[2.2.1]heptane (A-585539), K(i) = 0.2-0.6 nM or [(3)H]methyllycaconitine (MLA), 7 nM] that was at least 100-fold selective versus non-alpha7 nAChRs and other receptors. Functionally, ABT-107 did not evoke detectible currents in Xenopus oocytes expressing human or nonhuman alpha3beta4, chimeric (alpha6/alpha3)beta4, or 5-HT(3A) receptors, and weak or negligible Ca(2+) responses in human neuroblastoma IMR-32 cells (alpha3* function) and human alpha4beta2 and alpha4beta4 nAChRs expressed in human embryonic kidney 293 cells. ABT-107 potently evoked human and rat alpha7 nAChR current responses in oocytes (EC(50), 50-90 nM total charge, approximately 80% normalized to acetylcholine) that were enhanced by the positive allosteric modulator (PAM) 4-[5-(4-chloro-phenyl)-2-methyl-3-propionyl-pyrrol-1-yl]-benzenesulfonamide (A-867744). In rat hippocampus, ABT-107 alone evoked alpha7-like currents, which were inhibited by the alpha7 antagonist MLA. In dentate gyrus granule cells, ABT-107 enhanced spontaneous inhibitory postsynaptic current activity when coapplied with A-867744. In the presence of an alpha7 PAM [A-867744 or N-[(3R)-1-azabicyclo[2.2.2]oct-3-yl]-4-chlorobenzamide hydrochloride (PNU-120596)], the addition of ABT-107 elicited MLA-sensitive alpha7 nAChR-mediated Ca(2+) signals in IMR-32 cells and rat cortical cultures and enhanced extracellular signal-regulated kinase phosphorylation in differentiated PC-12 cells. ABT-107 was also effective in protecting rat cortical cultures against glutamate-induced toxicity. In summary, ABT-107 is a selective high affinity alpha7 nAChR agonist suitable for characterizing the roles of this subtype in pharmacological studies.