NEDD4相互作用タンパク質2、リソソームで分解された短い半減期タンパク質は、コネキシンのダウンレギュレーションを負に制御します43

NEDD4相互作用タンパク質2（NDFIP2）には3つの膜貫通ドメインがあり、そのN末端細胞質ドメインに位置するポリプロリンチロシン（PY）モチーフを介して複数のNEDD4ファミリーユビキチンリガーゼと相互作用します。NDFIP2は、NEDD4ユビキチンリガーゼとの基質のユビキチン化のアダプターとして機能すると仮定されています。ただし、NDFIP2がNEDD4基質のユビキチン化を促進または阻害するかどうかはまだ議論されています。ここでは、NDFIP2がゴルジ/トランスゴルジネットワーク（TGN）領域で検出されているが、半減期のcaでリソソームに急速に供給され、分解されることをここで示します。1.5 h。興味深いことに、小さな干渉RNA（siRNA）を伴うNDFIP2のノックダウン（KD）は、ギャップジャンクションの形成と機能の両方を損なっています。実際、NDFIP2のKDは、Pyモチーフを含むギャップジャンクションタンパク質コネキシン43を不安定にしました。これを支持して、NDFIP2の過剰発現はコネキシン43を安定化し、ギャップジャンクションの形成を強化しました。さらに、NEDD4、Atrophin-1相互作用タンパク質（AIP）4（AIP4）/ITCH、およびAIP2/WWP2との相互作用に必要なNDFIP2のPyモチーフは、NDFIP2のリソソームおよび/または/または/または/または/または/またはコネキシン43およびギャップジャンクションの安定性。総称して、これらの発見は、NDFIP2がConnexin43などのPyモチーフを含む膜タンパク質のNEDD4依存性ユビキチン化を競争力のある方法で阻害する可能性があることを示唆しています。

Nedd4-interacting protein 2 (NDFIP2) has three transmembrane domains and interacts with multiple Nedd4 family ubiquitin ligases through polyprolinetyrosine (PY) motifs located in its N-terminal cytoplasmic domain. It has been postulated that NDFIP2 acts as an adaptor for the ubiquitylation of substrates with Nedd4 ubiquitin ligase. However, whether NDFIP2 promotes or inhibits the ubiquitylation of Nedd4 substrates is still under debate. We show here that although NDFIP2 is detected in the Golgi/trans-Golgi network (TGN) area, it is rapidly delivered to and degraded in lysosomes with its half-life ca. 1.5 h. Intriguingly, knockdown (KD) of NDFIP2 with small interfering RNA (siRNA) impaired both the formation and function of gap junctions. Indeed, KD of NDFIP2 destabilized the gap junction protein connexin43 that contains PY motif. In support of this, overexpression of NDFIP2 stabilized connexin43 and enhanced the formation of gap junctions. Furthermore, the PY motifs of NDFIP2, which are required for its interaction with Nedd4, Atrophin-1 interacting protein (AIP) 4 (AIP4)/Itch, and AIP2/WWP2, were necessary for the targeting of NDFIP2 to lysosomes and/or the stability of connexin43 and gap junctions. Collectively these findings suggest that NDFIP2 may inhibit the Nedd4-dependent ubiquitylation of membrane proteins containing PY motifs, such as connexin43, in a competitive manner.