変換されていない線維芽細胞におけるC-Mycタンパク質発現

2つの変換されていない線維芽細胞株、マウススイス3T3およびヒトMRC-5におけるC-Mycタンパク質の発現を調べて定量化しました。CMYCタンパク質は静止細胞では検出できませんが、マイトジェン刺激により急速に誘導されます。ピーク発現は、血清刺激の約3〜5時間後に見られ、細胞あたり約3〜6000分子（MPC）に対応します。その後、レベルはコンフルエントな線維芽細胞の静止レベルに戻りますが、亜透過性細胞では1-3000 MPCで上昇したままです。C-Mycタンパク質はリン酸化されており、腫瘍細胞で見られるのと同じサイズと短い半減期を持っています。培地からの血清成長因子の除去は、細胞周期の位置に関係なく、すべての細胞からC-MYCタンパク質の非常に急速な損失を引き起こします。したがって、C-Myc発現は、乳腺の存在に継続的に依存しています。ただし、増殖細胞における発現の維持を義務付けている単一のテストされたマイトジェンはありません。代謝産物の飢ationまたはDNA合成を阻害する薬物による細胞の成長停止は、マイトゲンの存在に完全に依存しているC-MYCタンパク質の発現に影響を与えません。これらのデータは、成長調節シグナル伝達経路の細胞内積分器としての増殖細胞において、C-MYCタンパク質が継続的な役割を果たしていることと一致しています。

We have examined and quantitated the expression of c-myc protein in two untransformed fibroblast cell lines, murine Swiss 3T3 and human MRC-5, c-myc protein is not detectable in quiescent cells, but it is rapidly induced upon mitogenic stimulation. Peak expression is seen about 3-5 h after serum stimulation, and corresponds to about 3-6000 molecules per cell (mpc). Thereafter, levels fall back to a quiescent level in confluent fibroblasts, but remain elevated at 1-3000 mpc in subconfluent cells. The c-myc protein is phosphorylated and has the same size and short half-life as seen in tumour cells. Removal of serum growth factors from the culture medium causes very rapid loss of the c-myc protein from all cells, irrespective of their positions in the cell cycle. Thus, c-myc expression is continuously dependent upon the presence of mitogens. However, no single tested mitogen is obligatory for maintenance of expression in proliferating cells. Growth arrest of cells, either by metabolite starvation or by drugs which inhibit DNA synthesis, does not affect expression of the c-myc protein, which remains completely dependent upon the presence of mitogens. These data are consistent with the c-myc protein's having a continuous role in proliferating cells as an intracellular integrator of growth regulatory signalling pathways.