ネーブルオレンジワームからの一般的な臭気結合タンパク質へのフェロモン結合

MOTHの一般的な臭気剤結合タンパク質（GOBP）は、いわゆる「一般的な臭気剤」である性フェロモン以外の半工学の受容に関与すると仮定されています。以前は、へそオレンジワームのアンテナであるアミエロイストランジテラから分離されていた2つのGOBPS ATRAGOBP1とATRAGOBP2を発現しました。驚くべきことに、これらの2つのタンパク質は、成体のmoth、特に女性を引き付けることが知られている化合物に結合しませんでした。組換えタンパク質の適切な折りたたみと機能性は、両方のGOBPがpH依存的に非分析を結合したことを示す循環二色性分析と実証から推測されました。EAG実験により、女性の引き付け剤（1-フェニルエタノール、プロピオン酸フェニルエステル、および等酸フェニルエステル）が、1日目の4日目の成人女性のアンテナによる高感度で高感度で高感度で高感度で検出され、古いMOTHでの反応が低下することが示されました。性フェロモンの構成要素に反応する雄のアンテナについて、同じ年齢依存が示されました。興味深いことに、ATRAGOBP2は性フェロモンZ11Z13-16aldの主要成分を結合し、フェロモン結合タンパク質ATRAPBP1で示されたものに匹敵します。関連するアルコールは、ATRAGOBP2よりも親和性が高いATRAPBP1に結合しています。ATRAGOBP1は、両方のリガンドを低いがほぼ同じ親和性で結合しました。

General odorant-binding proteins (GOBPs) of moths are postulated to be involved in the reception of semiochemicals other than sex pheromones, the so-called "general odorants." We have expressed two GOBPs, AtraGOBP1 and AtraGOBP2, which were previously isolated from the antennae of the navel orangeworm, Amyelois transitella. Surprisingly, these two proteins did not bind compounds that are known to attract adult moths, particularly females. The proper folding and functionality of the recombinant proteins was inferred from circular dichroism analysis and demonstration that both GOBPs bound nonanal in a pH-dependent manner. EAG experiments demonstrated that female attractants (1-phenylethanol, propionic acid phenyl ester, and isobutyric acid phenyl ester) are detected with high sensitivity by the antennae of day-0 to day-4 adult females, with response declining in older moths. The same age-dependence was shown for male antennae responding to constituents of the sex pheromone. Interestingly, AtraGOBP2 bound the major constituent of the sex pheromone, Z11Z13-16Ald, with affinity comparable to that shown by a pheromone-binding protein, AtraPBP1. The related alcohol bound to AtraPBP1 with higher affinity than to AtraGOBP2. AtraGOBP1 bound both ligands with low but nearly the same affinity.