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ポリ（エチレングリコール）（PEG）は、多くの場合、血清半減期を増加させ、免疫原性を低下させ、生物学的利用能を高めるために化合物に付着します。PEGコンジュゲートの正確で敏感な定量化は、製品開発、薬物動態測定、および有効性の研究に重要です。ただし、ペグによるエピトープのマスキングにより、ペグ化化合物を定量化することは困難です。以前、ペグ化タンパク質の定量的検出のために、PEG（AGP3、IgMおよびE11、IgG）に対する2つのモノクローナル抗体を生成しました。ここで、PEGバックボーンの繰り返しサブユニットに結合し、より広い範囲のPEG化合物のより敏感な定量化を促進するPEG（AGP4、IGMおよび3.3、IgG）への2つの第2世代MABの同定を報告します。AGP4/3.3-ビオチンがキャプチャ/検出抗体として使用されたサンドイッチELISAは、元のAGP3/E11の組み合わせよりも14〜50倍の感度が高いPEG-QDOT 525の定量化を許可しました。PEGASYS（PEG-Interferon Alpha-2A）、PEG-Intron（PEG-Interferon Alpha-2B）、Neulasta（PEG-G-CSF）、およびLipo-Dox（Pegylated Liposomal Doxorubicin）も、低Ng/ML検出で定量化できます。制限。このアッセイは、50％のヒト血清または20％の遊離PEG分子の存在を許容しました。これらの新しい抗PEG抗体は、広範囲のペグ化化合物の定性的および定量分析に役立つと思われます。
ポリ（エチレングリコール）（PEG）は、多くの場合、血清半減期を増加させ、免疫原性を低下させ、生物学的利用能を高めるために化合物に付着します。PEGコンジュゲートの正確で敏感な定量化は、製品開発、薬物動態測定、および有効性の研究に重要です。ただし、ペグによるエピトープのマスキングにより、ペグ化化合物を定量化することは困難です。以前、ペグ化タンパク質の定量的検出のために、PEG（AGP3、IgMおよびE11、IgG）に対する2つのモノクローナル抗体を生成しました。ここで、PEGバックボーンの繰り返しサブユニットに結合し、より広い範囲のPEG化合物のより敏感な定量化を促進するPEG（AGP4、IGMおよび3.3、IgG）への2つの第2世代MABの同定を報告します。AGP4/3.3-ビオチンがキャプチャ/検出抗体として使用されたサンドイッチELISAは、元のAGP3/E11の組み合わせよりも14〜50倍の感度が高いPEG-QDOT 525の定量化を許可しました。PEGASYS（PEG-Interferon Alpha-2A）、PEG-Intron（PEG-Interferon Alpha-2B）、Neulasta（PEG-G-CSF）、およびLipo-Dox（Pegylated Liposomal Doxorubicin）も、低Ng/ML検出で定量化できます。制限。このアッセイは、50％のヒト血清または20％の遊離PEG分子の存在を許容しました。これらの新しい抗PEG抗体は、広範囲のペグ化化合物の定性的および定量分析に役立つと思われます。
Poly(ethylene glycol) (PEG) is often attached to compounds to increase serum half-life, reduce immunogenicity, and enhance bioavailability. Accurate and sensitive quantification of PEG conjugates is critical for product development, pharmacokinetic measurements, and efficacy studies. However, PEGylated compounds can be difficult to quantify due to epitope masking by PEG. We previously generated two monoclonal antibodies to PEG (AGP3, IgM and E11, IgG) for quantitative detection of PEGylated proteins. We now report the identification of two second-generation mAbs to PEG (AGP4, IgM and 3.3, IgG) that bind to the repeating subunits of the PEG backbone and facilitate more sensitive quantification of a wider range of PEGylated compounds. A sandwich ELISA in which AGP4/3.3-biotin was employed as the capture/detection antibodies allowed quantification of PEG-Qdot 525 with 14-50-fold greater sensitivity than the original AGP3/E11 combination. Pegasys (PEG-interferon alpha-2a), PEG-Intron (PEG-interferon alpha-2b), Neulasta (PEG-G-CSF), and Lipo-Dox (PEGylated liposomal doxorubicin) could also be quantified with low ng/mL detection limits. The assay tolerated the presence of 50% human serum or 20% free PEG molecules. These new anti-PEG antibodies appear useful for qualitative and quantitative analysis of a wide range of PEGylated compounds.
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