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環状ペプチドのファミリーであるDestruxinsは、さまざまな種の昆虫病原性真菌によって生成されます。これらのペプチドは、昆虫細胞株や骨格筋などの組織のカルシウム依存性プロセスに影響を与えることが示されています。昆虫の筋肉組織に対するこれらのペプチド毒素の作用メカニズムをよりよく理解するために、卵管の収縮とヤグスタムグラトリアの後腸の収縮に対する破壊Aの効果を評価しました。卵管では、Destruxin Aは自発的な収縮の頻度を増加させ、用量依存性の強壮剤収縮を誘導しました。下部および上部の外側卵管のEC(50)は、それぞれ0.7 microMおよび8.7 microMでした。HindGutでは、Destruxin Aも自発的な収縮の頻度を増加させました。EC(50)は3.2 microMでした。Destruxin Aの作用は、CA(2+) - 遊離生理食塩水で廃止された、またはCa(2+)チャネルブロッカーCOCL(2)をインキュベーション生理食塩水に加えたときに廃止されました。同様に、培地中に50ミクロムニフェジピンまたは100ミクロムベラパミルの存在は、特に後腸での破壊Aの効果の大きさを減らしました。100 mM K(+)生理食塩水による筋膜の脱分極により、破壊的な作用が防止されました。しかし、カルモジュリン阻害剤トリフルオペラジンのプレインキュベーションは、デストルキシンAの効果を大幅に減少させました。これらの結果は、デストルキシンAがL. migratoriaの昆虫の内臓筋肉の収縮に興奮性効果があることを示しています。破壊的なA誘発性収縮は細胞外に依存しているように見えますが、細胞内でリリースされたCa(2+)には依存していません。
環状ペプチドのファミリーであるDestruxinsは、さまざまな種の昆虫病原性真菌によって生成されます。これらのペプチドは、昆虫細胞株や骨格筋などの組織のカルシウム依存性プロセスに影響を与えることが示されています。昆虫の筋肉組織に対するこれらのペプチド毒素の作用メカニズムをよりよく理解するために、卵管の収縮とヤグスタムグラトリアの後腸の収縮に対する破壊Aの効果を評価しました。卵管では、Destruxin Aは自発的な収縮の頻度を増加させ、用量依存性の強壮剤収縮を誘導しました。下部および上部の外側卵管のEC(50)は、それぞれ0.7 microMおよび8.7 microMでした。HindGutでは、Destruxin Aも自発的な収縮の頻度を増加させました。EC(50)は3.2 microMでした。Destruxin Aの作用は、CA(2+) - 遊離生理食塩水で廃止された、またはCa(2+)チャネルブロッカーCOCL(2)をインキュベーション生理食塩水に加えたときに廃止されました。同様に、培地中に50ミクロムニフェジピンまたは100ミクロムベラパミルの存在は、特に後腸での破壊Aの効果の大きさを減らしました。100 mM K(+)生理食塩水による筋膜の脱分極により、破壊的な作用が防止されました。しかし、カルモジュリン阻害剤トリフルオペラジンのプレインキュベーションは、デストルキシンAの効果を大幅に減少させました。これらの結果は、デストルキシンAがL. migratoriaの昆虫の内臓筋肉の収縮に興奮性効果があることを示しています。破壊的なA誘発性収縮は細胞外に依存しているように見えますが、細胞内でリリースされたCa(2+)には依存していません。
Destruxins, a family of cyclic peptides, are produced by various species of entomopathogenic fungi. These peptides have been shown to influence calcium-dependent processes in insect cell lines and tissues, such as skeletal muscles. To better understand the mechanism of action of these peptide toxins on insect muscular tissues, we have evaluated the effects of destruxin A on the contractions of oviducts and hindgut of Locusta migratoria. In oviducts, destruxin A increased the frequency of spontaneous contractions and induced a dose-dependent tonic contraction; the EC(50) for lower lateral and upper lateral oviducts was 0.7 microM and 8.7 microM, respectively. In hindgut, destruxin A also caused an increase in the frequency of spontaneous contractions; the EC(50) was 3.2 microM. The action of destruxin A was abolished in Ca(2+)-free saline or when the Ca(2+) channel blocker CoCl(2) was added to the incubation saline. Likewise, the presence of 50 microM nifedipine or 100 microM verapamil in the medium reduced the magnitude of destruxin A's effect, particularly in hindgut. The depolarization of muscle membranes by 100 mM K(+) saline prevented the action of destruxin A. Preincubation of lower lateral oviducts in the intracellular Ca(2+) antagonist TMB-8 did not have any effect on destruxin A action; however, preincubation in the calmodulin inhibitor trifluoperazine greatly reduced the effect of destruxin A. Taken together, these results show that destruxin A has an excitatory effect on contractions of insect visceral muscles of L. migratoria. Destruxin A-induced contractions appear to be dependent on extracellular, but not on intracellularly-released Ca(2+), which suggest that this peptide toxin might be acting on insect visceral muscle by facilitating an influx of extracellular Ca(2+).
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