細胞培養におけるH2O2の細胞毒性効力：細胞濃度と暴露時間の影響

この研究でC6神経腫細胞を使用して、in vitroでH（2）O（2）Oの細胞毒性効力に曝露時間と細胞濃度がどのように影響するかを詳細に調査しました。細胞毒性濃度の中央値（EC（50））は500から30μmに減少し、インキュベーション時間が1から24時間に増加しました。24時間は、H（2）O（2）の初期の細胞毒性濃度を決定するのに十分であることが証明されました。初期EC（50）値は、細胞濃度に直線的に関連していました。430 nmol/mg細胞タンパク質または860 nmol/10（7）細胞の細胞濃度非依存性の細胞毒性細胞用量（ED（50））が由来しました。細胞毒性H（2）O（2）濃度の中央値は、H（2）O（2）と細胞濃度の両方に比例する速度で培地から完全に排除されました。EC（50）の値とは対照的に、濃度と時間曲線（AUC）の下での対応する領域は細胞濃度とは無関係で、1800μm×minになりました。細胞濃度が減少すると、H（2）O（2）排出量は減速し、したがって、ボーラスとして適用されるH（2）O（2）への曝露は、安定したH（2）O（2）濃度への連続暴露に近づきます。まとめると、我々の結果は、ボーラスとして培養細胞に投与されるH（2）O（2）の細胞毒性効力は、その初期濃度、細胞がHを除去する能力に依存するAUCによって特徴付けられることを示しています（2）O（2）、および細胞濃度。初期の毒性細胞用量（例：Nmol H（2）O（2）/mg細胞タンパク質またはNmol H（2）O（2）/によってin vitroでH（2）O（2）の毒性効力を表現することをお勧めします。特に比較目的のために、10（7）細胞）。

Using C6 glioma cells in this study we investigated in detail how exposure time and cell concentration affect the cytotoxic potency of H(2)O(2) in vitro. Median cytotoxic concentrations (EC(50)) decreased from 500 to 30 μM with increasing incubation time from 1 to 24h. Twenty-four hours proved to be sufficient to determine incipient cytotoxic concentrations of H(2)O(2). The incipient EC(50) values were linearly related to the cell concentration. A cell concentration-independent median cytotoxic cell dose (ED(50)) of 430 nmol/mg cell protein or 860 nmol/10(7) cells was derived. Median cytotoxic H(2)O(2) concentrations were completely eliminated from the culture medium at a rate proportional to both the H(2)O(2) and the cell concentrations. In contrast to EC(50) values the corresponding areas under the concentration versus time curve (AUC) were independent of the cell concentration and amounted to 1800 μM×min. With decreasing cell concentration the H(2)O(2) elimination decelerates and, thus, exposure to H(2)O(2) applied as a bolus approaches a continuous exposure to a steady H(2)O(2) concentration. Taken together, our results indicate that the cytotoxic potency of H(2)O(2) administered to cultured cells as a bolus is characterized by the AUC, which depends on its initial concentration, the ability of the cells to eliminate H(2)O(2), and the cell concentration. We recommend expressing the toxic potency of H(2)O(2) in vitro by the incipient toxic cell dose (e.g., nmol H(2)O(2)/mg cell protein or nmol H(2)O(2)/10(7) cells), in particular for comparative purposes.