レスベラトロールは、カタラーゼ、SOD-1、およびHO-1発現を増加させることにより、ヒトレンズ上皮細胞をH2O2誘導酸化ストレスから保護します

目的：H（2）O（2）治療によって誘発される酸化的損傷は、レンズ上皮を不可逆的に損傷し、細胞死と白内障を引き起こす可能性があります。レスベラトロール（RES）とのインキュベーションにより培養されたヒトレンズ上皮細胞で酸化ストレスの効果が減衰するかどうかはまだ不明です。本研究では、ヒトレンズ上皮B-3（HLEB-3）細胞をH（2）O（2）誘導細胞死および細胞アポトーシスに対して保護する際のレスベラトロールの機能を調べました。（2）細胞内反応性酸素種（ROS）の蓄積を誘導し、レスベラトロールが効果の根底にあるメカニズムを調査しました。 方法：ヒトのレンズ上皮細胞株であるHLEB-3細胞は、異なる濃度で異なる期間にわたってRES前処理の有無にかかわらず100ママH（2）O（2）O（2）にさらされました。細胞の生存率は、4- [3- [4-ヨードフェニル] -2-4（4-ニトロフェニル）-2H-5-テトラゾリオ-1,3-ベンゼンジスルホネート]（WST-1）アッセイで監視されました。アポトーシス率とROS生成は、フローサイトメトリー分析によって検出されました。スーパーオキシドジスムターゼ-1（SOD-1）、カタラーゼ、およびヘムオキシゲナーゼ-1（HO-1）タンパク質の発現レベルは、西部ブロッティング分析によって測定されました。P38およびC-Jun N末端キナーゼ（JNK）の活性化も、西部ブロッティング分析によって評価されました。 結果：レスベラトロールは、H（2）O（2）誘導細胞アポトーシスとROS蓄積を明らかに減少させました。H（2）O（2）からのHLEB-3細胞は酸化的損傷を誘導し、SOD-1、カタラーゼ、およびHO-1の発現レベルを増加させました。さらなる研究では、RESがH（2）O（2）がp38およびJNKリン酸化を誘導することも阻害することが示されました。 結論：これらの発見は、おそらくカタラーゼ、SOD-1、およびHO-1を含む3つの抗酸化酵素を誘導することにより、RESがH（2）O（2）からHLEB-3細胞をH（2）O（2）から保護したことを示唆しました。

PURPOSE: Oxidative damage induced by H(2)O(2) treatment can irreversibly damage the lens epithelium, resulting in cell death and cataract. Whether the effects of oxidative stress could be attenuated in cultured human lens epithelial cells by incubation with resveratrol (RES) is still unknown. In the present study, we examined the function of resveratrol in protecting human lens epithelial B-3 (HLEB-3) cells against H(2)O(2) induced cell death and cell apoptosis, its role in reducing H(2)O(2) induced intracellular reactive oxygen species (ROS) accumulation, and investigated the mechanism by which resveratrol underlies the effect. METHODS: HLEB-3 cells, a human lens epithelial cell line, were exposed to 100 muM H(2)O(2) with or without RES pre-treatment at different concentrations for different time duration. Cell viabilities were monitored by 4-[3-[4-iodophenyl]-2-4(4-nitrophenyl)-2H-5-tetrazolio-1,3-benzene disulfonate] (WST-1) assay. The apoptosis rate and ROS generation were detected by flow cytometric analysis. Expression levels of superoxide dismutases-1 (SOD-1), catalase, and heme oxygenase-1 (HO-1) proteins were measured by western-blotting analysis. p38 and c-jun N terminal kinase (JNK) activation was also evaluated by western-blotting analysis. RESULTS: Resveratrol clearly reduced H(2)O(2) induced cell apoptosis and ROS accumulation; protected HLEB-3 cells from H(2)O(2) induced oxidative damage, and increased the expression levels of SOD-1, catalase, and HO-1. Further studies showed that RES also inhibited H(2)O(2) induced p38 and JNK phosphorylation. CONCLUSIONS: These findings suggested that RES protected HLEB-3 cells from H(2)O(2) induced oxidative damage, presumably by inducing three antioxidative enzymes including catalase, SOD-1, and HO-1.