3T3-L1脂肪細胞分化に対するコラーゲンIおよび大動脈カルボキシペプチダーゼ様タンパク質の効果

大動脈カルボキシペプチダーゼ様タンパク質（ACLP）は、前脂肪細胞で発現し、脂肪生成中にダウンレギュレートされた分泌タンパク質です。脂肪生成に対するACLPの過剰発現の影響に関する以前の研究の結果は、無効から完全な阻害までさまざまです。ACLPは、それが結合するタンパク質であるコラーゲンIの存在下で脂肪生成を調節する可能性があると仮定しました。コントロール（PLXSN）3T3-L1前脂肪細胞を、標準対コラーゲンIコーティングディッシュで成長した3T3-L1前脂肪細胞と安定してExpressing ACLP（PLXSN-ACLP）と比較しました。レトロウイルス形質導入を介した大動脈カルボキシペプチダーゼ様タンパク質の過剰発現により、ACLP細胞レベルが3.2倍増加し、ACLPレベルが培地に放出される2.1倍の増加をもたらしました。大動脈カルボキシペプチダーゼ様タンパク質の過剰発現は、標準皿の分化を阻害しませんでした。標準皿と比較したコラーゲンIコーティング皿では、分化するように誘導された場合、プリアディポサイトを制御し、トリアシルグリセロールの蓄積に同じ増加を示しましたが、脂肪酸シンターゼ、ペルオキシソームプロリファレータ活性化受容体γγの有意に高い誘導（1.6倍）を示しました。（さらに1.4倍）、CCAAT/エンハンサー結合タンパク質α（1.4倍以上）。大動脈カルボキシペプチダーゼ様タンパク質の過剰発現は、この脂肪酸シンターゼ、ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体γ、およびCCAAT/エンハンサー結合タンパク質αのこの誘導の増強をそれぞれ65％、59％、および66％減少させましたが、それはそれぞれ65％、59％、および66％でしたが、効果はありませんでしたが、効果はありませんでしたが、効果はありませんでした。分化中のトリアシルグリセロールの蓄積。最後に、ACLP過剰発現の前脂肪細胞におけるプロジポニー酸化インスリンシグナル伝達に関する研究により、インスリン刺激AKTリン酸化は、コラーゲンIで培養された細胞で標準皿で培養された細胞で27％減少したことが示されました。私たちのデータは、ACLPがコラーゲンIに富む環境で3T3-L1脂肪生成の特定の側面を阻害することを示唆しています。

Aortic carboxypeptidase-like protein (ACLP) is a secreted protein expressed in preadipocytes and down-regulated during adipogenesis. Results from previous studies on the influence of ACLP overexpression on adipogenesis vary from no effect to complete inhibition. We hypothesized that ACLP may modulate adipogenesis in the presence of collagen I, a protein to which it binds. We compared control (pLXSN) 3T3-L1 preadipocytes with 3T3-L1 preadipocytes stably overexpressing ACLP (pLXSN-ACLP) that were grown in standard vs collagen I-coated dishes. Aortic carboxypeptidase-like protein overexpression, via retroviral transduction, resulted in a 3.2-fold increase in ACLP cellular levels and a 2.1-fold increase in ACLP levels released into medium. Aortic carboxypeptidase-like protein overexpression did not inhibit differentiation in standard dishes. In collagen I-coated dishes compared with standard dishes, control preadipocytes, when induced to differentiate, exhibited the same increase in triacylglycerol accumulation, but showed a significantly higher induction of fatty acid synthase (1.6-fold more), peroxisome proliferator-activated receptor γ (1.4-fold more), and CCAAT/enhancer-binding protein α (1.4-fold more). Aortic carboxypeptidase-like protein overexpression significantly reduced this enhanced induction of fatty acid synthase, peroxisome proliferator-activated receptor γ, and CCAAT/enhancer-binding protein α by 65%, 59%, and 66%, respectively, but had no effect on the accumulation of triacylglycerol during differentiation. Finally, studies on proadipogenic insulin signaling in ACLP-overexpressing preadipocytes demonstrated that insulin-stimulated Akt phosphorylation was significantly decreased by 27% in cells cultured in collagen I-coated dishes vs standard dishes. Our data suggest that ACLP inhibits certain aspects of 3T3-L1 adipogenesis in a collagen I-rich environment.