転写リプレッサーGFI-1の発現は、C/EBP {alpha}によって調節され、P210BCR/ABL発現細胞におけるその増殖およびコロニー形成阻害効果に関与しています。

P210BCR/ABL発現細胞におけるCAAT/エンハンサー結合タンパク質α（C/EBPα）の異所性発現は、顆粒球の分化を誘導し、増殖を阻害し、白血病形成を抑制します。これらの生物学的効果の根底にある分子メカニズムを分析するために、C/EBPα調節遺伝子は、32D-P210BCR/ABL細胞のマイクロアレイ分析によって特定されました。BCR/ABL発現細胞でDNA結合依存的にC/EBPαによって発現が活性化された遺伝子の1つは、転写リプレッサーGFI-1です。ここでは、C/EBPαがGFI-1 5'-flanking領域の機能的C/EBP結合部位と相互作用し、GFI-1のプロモーター活性を高めることを示します。さらに、K562細胞では、GFI-1発現のRNA干渉を介したダウンレギュレーションは、C/EBPαの分化誘導効果ではなく、増殖阻害を部分的に救助しました。野生型GFI-1の異所性発現は、転写リプレッサー変異体（GFI-1P2A）ではなく、増殖を阻害し、コロニー形成を著しく抑制しましたが、BCR/ABL発現細胞の顆粒球分化を誘導しませんでした。対照的に、GFI-1ショートヘアピンRNA型CD34（+）慢性骨髄性白血病細胞は、スクランブル移植された対応物よりも著しくクローン原性でした。一緒に、これらの研究は、GFI-1がBCR/ABL発現細胞におけるその増殖および生存阻害効果に必要なC/EBPαの直接的な標的であることを示しています。

Ectopic expression of CAAT/enhancer binding protein α (C/EBPα) in p210BCR/ABL-expressing cells induces granulocytic differentiation, inhibits proliferation, and suppresses leukemogenesis. To dissect the molecular mechanisms underlying these biological effects, C/EBPα-regulated genes were identified by microarray analysis in 32D-p210BCR/ABL cells. One of the genes whose expression was activated by C/EBPα in a DNA binding-dependent manner in BCR/ABL-expressing cells is the transcriptional repressor Gfi-1. We show here that C/EBPα interacts with a functional C/EBP binding site in the Gfi-1 5'-flanking region and enhances the promoter activity of Gfi-1. Moreover, in K562 cells, RNA interference-mediated downregulation of Gfi-1 expression partially rescued the proliferation-inhibitory but not the differentiation-inducing effect of C/EBPα. Ectopic expression of wild-type Gfi-1, but not of a transcriptional repressor mutant (Gfi-1P2A), inhibited proliferation and markedly suppressed colony formation but did not induce granulocytic differentiation of BCR/ABL-expressing cells. By contrast, Gfi-1 short hairpin RNA-tranduced CD34(+) chronic myeloid leukemia cells were markedly more clonogenic than the scramble-transduced counterpart. Together, these studies indicate that Gfi-1 is a direct target of C/EBPα required for its proliferation and survival-inhibitory effects in BCR/ABL-expressing cells.