無傷の3次元関係を視覚化し、成体ニュート脊髄を再生するための蛍光全体のマウント方法

アダルトニュートは、完全な切断損傷の後、脊髄を再生する顕著な能力を持っています。このプロセスを理解するために、蛍光プローブ（ストレプトアビジンと抗体）と共焦点顕微鏡を使用した全マウント調製の再生中に細胞および分子イベントを視覚化する方法を開発しました。この方法は、固定、組織のトリミング、蛍光プローブの浸透、クリアに関連するさまざまなパラメーターによって最適化され、無傷で再生されるニュート脊髄を観察する能力の大きな進歩を表しています。これらの方法は、他のモデルシステムからの他のニュート組織や成体組織の研究にも広く適用できる必要があります。

Adult newts have the remarkable ability to regenerate their spinal cords after a complete transection injury. To understand this process, we have developed a method for visualizing the cellular and molecular events during regeneration in whole-mount preparations using fluorescent probes (streptavidins and antibodies) and confocal microscopy. This method was optimized by varying parameters associated with fixation, tissue trimming, fluorescent probe penetration, and clearing and represents a significant advance in our ability to observe the intact and regenerating newt spinal cord. These methods should also be widely applicable to the study of other newt tissues and adult tissues from other model systems.