システニルロイコトリエン2型受容体のM201V多型に関連する微分シグナル伝達欠陥

システニルロイコトリエン（Cyslts）LTC（4）、LTD（4）、およびLTE（4）は、喘息を含むさまざまな炎症性疾患に関与し、少なくとも2つの異なる受容体、Cyslt（1）およびCysltに作用します。（2）。現在、Cyslt（1）の特定の拮抗薬は、喘息患者の気管支収縮と炎症を制御するために使用されています。喘息におけるCyslt（2）の潜在的な役割は、よく理解されていないままです。Cyslt（2）遺伝子の多型は、単一のアミノ酸置換（M201V）をもたらし、3つの別々の集団研究で喘息に関連していることがわかりました。ここでは、M201V変異がその天然リガンドとシグナル伝達効率についてCyslt（2）の親和性に影響を与えたかどうかを調査しました。ヒト胚性腎臓293細胞に、野生型（WT）または変異体（M201V）CySLT（2）を安定してトランスフェクトしました。LTC（4）のM201V受容体の親和性は50％減少しましたが、LTD（4）の親和性は本質的に失われました。M201V発現細胞におけるイノシトールリン酸塩（IPS）のLTC（4）誘導産生は、リガンドの最適濃度で有意に減少しましたが、高濃度では違いは観察されませんでした。対照的に、Ltd（4）によるIP産生は、WT発現細胞よりもM201V-の方が10〜100倍少なかった。LTC（4）またはLTD（4）によって誘導されるインターロイキン-8プロモーターのトランス活性化でも同様の結果が観察されました。さらに、WT発現細胞とは対照的に、核因子κBP65のリン酸化はLTD（4）刺激M201V発現細胞に存在しませんでした。同様に、C-Jun N末端キナーゼのリン酸化はLTD（4）刺激M201V細胞では誘導されませんでしたが、細胞外反応キナーゼとp38の活性化は少なくとも高いLTD（4）濃度で維持されました。我々の結果は、M201V多型がLTD（4）に対するCySLT（2）の応答に劇的に影響し、LTC（4）に対する応答が劇的に影響することを示しています。

The cysteinyl-leukotrienes (cysLTs) LTC(4), LTD(4), and LTE(4), are involved in a variety of inflammatory diseases, including asthma, and act on at least two distinct receptors, CysLT(1) and CysLT(2). Specific antagonists of CysLT(1) are currently used to control bronchoconstriction and inflammation in asthmatic patients. The potential role of CysLT(2) in asthma remains poorly understood. A polymorphism in the CysLT(2) gene, resulting in a single amino acid substitution (M201V), was found to be associated with asthma in three separate population studies. Here, we investigated whether the M201V mutation affected the affinity of CysLT(2) for its natural ligands and its signaling efficiency. Human embryonic kidney 293 cells were stably transfected with either wild-type (wt) or mutant (M201V) CysLT(2). Affinity of the M201V receptor for LTC(4) was reduced by 50%, whereas affinity for LTD(4) was essentially lost. LTC(4)-induced production of inositol phosphates (IPs) in M201V-expressing cells was significantly decreased at suboptimal concentrations of the ligand, but no difference was observed at high concentrations. In contrast, LTD(4)-induced IP production was 10- to 100-fold less in M201V- than in wt-expressing cells. Similar results were also observed with the transactivation of the interleukin-8 promoter induced by LTC(4) or LTD(4). Moreover, in contrast to wt-expressing cells, phosphorylation of nuclear factor κB p65 was absent in LTD(4)-stimulated M201V-expressing cells. Likewise, phosphorylation of c-Jun N-terminal kinase was not induced in LTD(4)-stimulated M201V cells, whereas activation of extracellular response kinase and p38 was maintained, at least at higher LTD(4) concentrations. Our results indicate that the M201V polymorphism drastically affects CysLT(2) responses to LTD(4) and less to LTC(4).