マルトース結合タンパク質に融合したタンパク質の精製

マルトース結合タンパク質（MBP）は、細菌細胞で組換えタンパク質の産生に使用されている最も人気のある融合パートナーの1つです。MBPを使用すると、アミロースアガロースカラムで単純なキャプチャアフィニティステップを使用することができ、その結果、純度70〜90％のタンパク質が生まれます。タンパク質分離アプリケーションに加えて、MBPは高度な翻訳を提供し、標的タンパク質の適切な折りたたみと溶解度を促進します。この章では、高度に精製されたMBPターゲットタンパク質を分離するための効率的な手順について説明します。構造決定研究、タンパク質活性アッセイ、標的タンパク質の化学的特性の評価などの下流のアプリケーションの考慮事項に特に注意が払われています。

Maltose-binding protein (MBP) is one of the most popular fusion partners being used for producing recombinant proteins in bacterial cells. MBP allows one to use a simple capture affinity step on amylose-agarose columns, resulting in a protein that is often 70-90% pure. In addition to protein-isolation applications, MBP provides a high degree of translation and facilitates the proper folding and solubility of the target protein. This chapter describes efficient procedures for isolating highly purified MBP-target proteins. Special attention is given to considerations for downstream applications such as structural determination studies, protein activity assays, and assessing the chemical characteristics of the target protein.